المعلمات المناعية للفروج المكملة بالممتازات والتحديد الكمي للسموم الفطرية

العلوم البيطرية والحيوانية 2022 ؛ 10 (4): 78-82 http://www.sciencepublishinggroup.com/j/avs doi: 10.11648 / j.avs.20221004.11 ISSN: 2328-5842 (طباعة) ؛ ISSN: 2328-5850 (عبر الإنترنت)

1. مقدمة على الصعيد العالمي ، تلوث الطعام والأعلاف بشكل خطير بالسموم الفطرية ، ومن أكثرها شيوعًا الأفلاتوكسين ، والزيرالينون ، والفومونيزين ، والديوكسينيفالينول ، والأوكراتوكسين.

إن استهلاك حيوانات المزرعة للسموم الفطرية ، بمستويات لا تسبب التسمم الفطري السريري ، يثبط وظائف المناعة وقد يقلل من مقاومة الأمراض المعدية [1]. هناك العديد من المعلمات ذات الصلة لتقييم الحالة المناعية للحيوانات ، بما في ذلك البلعمة ومقايسات الإنترلوكين. وفقًا لساتلر وآخرون. [24] ، أصبح البلعمة عملية مركزية لخط الدفاع الأول لجهاز المناعة ضد مسببات الأمراض. تلتقط البالعات المحترفة الميكروبات ، وتقتلها وتهضمها ، وتنشط الاستجابة المناعية اللاحقة. بشكل أساسي ، تمثل السيتوكينات شبكة متكاملة من الوسطاء الخلويين القادرة على إحداث تأثيرات بيولوجية متنوعة تتأثر بالحالة السائدة للكائن الحي [2]. السيتوكينات الطيور ، على غرار الثدييات ، لها تأثير في الاستجابة المناعية للمضيف للعدوى المسببة للأمراض. عادة ما تصنف السيتوكينات على أنها مؤيدة للالتهابات أو مضادة للالتهابات ، ويتم إفرازها من قبل مجموعات متنوعة من الخلايا بعد التحفيز [21]. والجدير بالذكر أن كلا النوعين المؤيدين للالتهاب والمضاد للالتهابات يثيران استجابات متميزة لمواد المناعة في مراحل مختلفة من العدوى [3]. يعتبر IL-6 مؤشرا مبكرا وحساسا للتفاعلات الالتهابية. إنه المنشط الأساسي لتخليق بروتين المرحلة الحادة في الكبد. في الحالات الالتهابية ، يزيد تركيز IL-6 في مصل المرضى عدة مرات [5]. Interleukin IL10 هو أحد السيتوكينات الرئيسية المضادة للالتهابات. قمع الوظائف المميزة للخلايا القاتلة الطبيعية والخلايا اللمفاوية التائية بشكل رئيسي ، ويمنع إنتاج IL-12 والسيتوكينات الأخرى المؤيدة للالتهابات (مثل TNFα و IL-6 و IL-1β) بواسطة APCs [20 ، 27]. يمنع IL-10 زيادة التعبير عن العديد من الجينات في الخلايا البلعمية والتغصنية التي يتم تحفيزها عادة عن طريق تحفيز TLRs (مستقبلات تشبه الرسوم) [27]. يهدف استخدام مواد إزالة السموم الفطرية كإضافات للأعلاف إلى تقليل سمية السموم الفطرية في مكونات العلف الملوثة ، مما يسمح باستخدامها في تركيبات الأعلاف الحيوانية [16]. هناك مجموعة واسعة من مزيلات السموم الفطرية ، مع عدد لا يحصى من الادعاءات [12]. الهدف من هذه الدراسة هو تقييم تأثير مختلف المواد الماصة للسموم الفطرية ، بتركيبات مختلفة ، على المتغيرات المناعية لدجاج اللاحم الذي تم اختباره باستخدام السموم الفطرية مثل الأفلاتوكسين ، الفومونيزين و DON. بخمسة معالجات وستة مكررات بإجمالي 30 وحدة تجريبية كل قفص عبارة عن وحدة تجريبية مكونة من عشرة طيور.

تمت صياغة الأنظمة الغذائية التجريبية لتلبية المتطلبات الغذائية ، وفقًا لتوصيات المجلس النرويجي للاجئين [22]. كانت الوجبات الغذائية متساوية البوتاسيوم ومتساوية البروتين والأيزوفيتامين ، وفقًا للتركيب الموضح في الجدول 1. تم تحليل المواد الخام والوجبات الغذائية التجريبية لوجود السموم الفطرية (أفلاتوكسين ، ديوكسينيفالينول ، دياسيتوكسيسيربينول ، أومونيزين ، أوكراتوكسين أ ، توكسين T-2) و zearalenone ، ولم يتم اكتشاف أي سموم فطرية في المواد الخام المستخدمة.   مستوى ضمان واحد لكل كيلوغرام من المنتج: حمض الفوليك: 140 مجم / كجم ؛ حمض بانتوت 1700 ملغم / كغم ؛ البيوتين: 15 مغ / كغ ؛ الكالسيوم: 30/130 جم / كجم ؛ النحاس: 1410 ملغم / كغم ؛ الكولين: 40 جم / كجم DL- ميثيونين: 260 جم / كجم ؛ إنراميسين: 1333 ملغم / كغم ؛ الحديد: 8500 ملغم / كغم من اليود: 150 ملغم / كغم ؛ ليسين: 50 جم / كجم ؛ المنغنيز: 12 جم / كجم ؛ النياسين: 5930 ملغم / كغم ؛ السيلينيوم: 45 ملغم / كغم ؛ فيت. ج: 1800000 وحدة دولية / كجم ، فيتامين. B1: 580 مجم / كجم ؛ فيت. B12: 3000 ميكروغرام / كغ ؛ فيت. B2: 960 مغ / كغ ؛ فيت. B6: 730 مغ / كغ ؛ فيت. D3: 300000 وحدة دولية / كجم ؛ فيت. E: 3750 وحدة دولية / كجم ؛ فيت. K3: 300 مجم / كجم زنك: 9170 مجم / كجم.

الجدول 1. تكوين الحميات.

مكونات	%
حبوب ذرة	63,00
وجبة فول الصويا	29,80
زيت الصويا	3,00
ليسين	0,10
ميثيونين	0,04
ثاني فوسفات الكالسيوم	2,00
الحجر الجيري الكلسي	1,00
ملح	0,46
بريمكس1	0,60
التركيب المحسوب
بروتين خام	20%
الطاقة الأيضية	3050 كيلو كالوري / كغ
التقى + كيس	0,95%
ليسين	1,19%
الكالسيوم	0,95%
الفوسفور متاح	0,48%
صوديوم	0,22%

2. المواد والطرق 2.1. الحيوانات تمت الموافقة على هذا المشروع من قبل لجنة الأخلاقيات في استخدام الحيوانات (CEUA) التابعة لشركة SAMITEC - CEUA / SAMITEC.288.274. تم استخدام 300 دجاجة من ذكور التسمين من خط 500 كوب ، بعمر يوم واحد بمتوسط وزن 41.88 جرام. تم إجراء الاختبار التجريبي في غرفة التجارب 22 م2، مع الضغط السلبي ، متأقلمة. تم إيواء الحيوانات في أقفاص تجريبية ، يبلغ عرض كل منها 0.5 متر وطولها 0.5 متر وارتفاعها 0.33 متر ، مرتبة في أربعة مستويات متداخلة ، كل مستوى به قفصان. كان لكل قفص شارب من نوع المغذي ، وشارب من نوع الحلمة مع ضبط الارتفاع. 2.2. التصميم التجريبي والوجبات الغذائية تم توزيع الطيور بشكل عشوائي تمامًا. استقبلت الطيور العلف والماء خلال فترة التجربة (1 - 21 يوم). تم اختبار ثلاث مواد ماصة من السموم الفطرية بتركيبات مختلفة ، والتي أضيفت 2.5 كجم / كجم ، في الأنظمة الغذائية الملوثة بالسموم الفطرية ، باستخدام 1.0 جزء في المليون من الأفلاتوكسين + 50.0 جزء في المليون من الفومونيزين + 25.0 جزء في المليون من DON.

تم الحصول على الأفلاتوكسينات (B1 و B2 و G1 و G2) من زراعة سلالة ذيفان من الرشاشيات الطفيلية، والتركيزات المستخدمة كانت B1: 93.8% ، B2: 2.1% ، G1: 3.4% و G2: 0.7%. تم الحصول على الفومونيزين (B1 و B2) من زراعة سلالة ذيفان أحادي الشكل الفيوزاريوم، والتركيزات المستخدمة كانت 95.8% من B1 و 4.2% من B2. وتم الحصول على السموم الفطرية ديوكسينيفالينول (DON) من زراعة سلالة ذيفان من الحزام الفيوزاريوم. قمنا بتقييم نظام غذائي للتحكم بدون تلوث ، ونظام غذائي ملوث بالسموم الفطرية بدون نظام غذائي ماص وملوث + SIM - FIX HP®، حمية ملوثة + ممتزات أ ، حمية ملوثة + ممتزات ب. ممتزات SIM - FIX HP® يقدم نفسه في تركيبته: 1.3 و 1.6 بيتا جلوكان ، بوليسين بنتونايت ، كربون منشط ، جزيء عضوي ، سيليمارين وسيلينيوم عضوي. ووفقًا لما أبلغت به الشركات المصنعة ، على العبوة المعنية ، تحتوي المادة الممتزة A على التركيبة التالية: خميرة البيرة الجافة (جلوكومانان) ، سيليكات الصوديوم والكالسيوم ، ودقيق المحار. بينما يتكون الممتز B من: البنتونيت ، الدياتومايت ، Eubacterium sp ، دقيق الأعشاب البحرية ، الخميرة المعطلة ، لب الهندباء المجفف.

2.3. انترلوكين IL 6 و IL 10 التعبير الجيني في نهاية الفترة التجريبية ، تم جمع لوزتي سيكل وتم تحديد التعبير عن الإنترلوكينات المؤيدة للالتهابات (IL 6) والمضادة للالتهابات (IL 10) عن طريق قياس التعبير الجيني بواسطة RT-qPCR. يتم إجراء القياس الكمي للتعبير الجيني بواسطة RT-qPCR ، باستخدام بادئات محددة (بادئات) لكل هدف. في هذا النوع من التحليل ، تولد كل مجموعة من الهدف والعينة قيمة عتبة ، Ct (دورة العتبة) ، وهي مقياس لتركيز الحمض النووي الريبي المرسال المحدد الهدف (mRNA) في العينة. يجب تطبيع قيمة Ct كدالة للجينات المرجعية المختارة مسبقًا ، مما يؤدي إلى إنشاء قيمة deltaCt (dCt) (الجين المرجعي Ct target-Ct). لاستخراج الحمض النووي الريبي ، تم تجانس 100 مجم تقريبًا من الأنسجة في TissueLyser (Qiagen) ، وتمت تنقية إجمالي الحمض النووي الريبي عن طريق الاستخلاص باستخدام TRI Reagent (Sigma) - chloroform. عولجت المستخلصات باستخدام turboDNaseI (Ambion) وتم قياس كمية الحمض النووي الريبي باستخدام NanoDrop (Thermo Scientific). تم تصنيع (كدنا) باستخدام مجموعة النسخ العكسي (كدنا) عالية الإنتاجية (النظم البيولوجية التطبيقية) ، باستخدام 1 ميكروغرام من الحمض النووي الريبي لكل تفاعل. تم تخفيف cDNAs 5x في ماء MilliQ المعقم ، والأهداف محددة كمياً باستخدام Bright-Green PCR Master Mix (Biotium) في جهاز تدوير حراري QuantStudio 3 (Thermo). كانت الدورة المستخدمة 95 درجة مئوية 10 دقائق ، تليها 40 دورة 95 درجة مئوية و 15 ثانية و 60 درجة مئوية دقيقة واحدة. تم استخدام برنامج Primer Express 3.0 لتصميم البادئات قليلة النوكليوتيد. تم استخدام جينات GAPDH و ACTB كعناصر تحكم داخلية ، وتم تحديد التعبير الجيني النسبي باستخدام طريقة 2-∆∆Ct [17]. 2.4. تحليل احصائي خضعت البيانات لتحليل التباين ومقارنة الوسائل عن طريق اختبار Tukey عند 5%.   3. نتائج ومناقشة نتائج التعبير الجيني للإنترلوكين IL-6 و IL-10 موضحة في الشكل 1. لوحظ تعبير أقل من IL-6 في الطيور التي تلقت نظامًا غذائيًا ملوثًا بالسموم الفطرية + الممتزات B ، والتي تعمل على احتواء الإنتاج من الجزيئات المؤيدة للالتهابات للحد من تلف الأنسجة والحفاظ على توازن الأنسجة واستعادتها.

يمكن تلخيص تأثير السموم الفطرية على الجهاز المناعي للدواجن على النحو التالي: اكتئاب نشاط الخلايا اللمفاوية التائية أو البائية (الجراب التراجعي والغدة الصعترية) ، إنتاج الغلوبولين المناعي والأجسام المضادة المكبوتة ، انخفاض نشاط المكمل أو الإنترفيرون ، ضعف وظيفة الخلية المستجيبة للبلاعم ، و تقليل عيار الأجسام المضادة وتركيز المضادات الحيوية في الدم [11]. في الأساس ، تتوسط السيتوكينات في نتيجة الاستجابة المناعية الفعالة وتعمل كواجهة بين الذراعين (أي العناصر الفطرية والتكيفية) لنظام مناعي معقد بخلاف ذلك [9]. IL-6 له أيضًا تأثير بيروجيني. جنبا إلى جنب مع IL-1 و TNF و INF ، يمكن لهذا السيتوكين زيادة درجة حرارة الجسم بشكل كبير عن طريق تحفيز إنتاج البروستاجلاندين. إن الزيادة في إنتاج IL-6 والحفاظ على تركيز مصل مرتفع من هذا السيتوكين يعزز الانتقال من رد الفعل الالتهابي الحاد إلى المرحلة المزمنة [5]. لوحظ أعلى تعبير لـ IL-10 ، مع الأخذ في الاعتبار سيناريو التلوث وإضافة الممتزات ، في المجموعة التي تواجه تحديًا واستكملها بالمادة الماصة YES - FIX HP. من المحتمل أن تكون هذه الحقيقة مرتبطة بتكوينها ونتجت عن التآزر بين مكوناتها النشطة. بالإضافة إلى المواد الخام المسؤولة عن امتصاص السموم الفطرية الرئيسية الموجودة في هذا المجال ، تحتوي هذه المادة الممتزة على مبادئ معروفة بأنها ذات تأثير مناعي ومضاد للأكسدة ومضاد للالتهابات 1.3 و 1.6 بيتا جلوكان من الخميرة Sacharomyces cerevisiae ، السيلينيوم العضوي ومستخلص شوك الحليب (سيليمارين) على عكس الممتزات الأخرى التي تم تحليلها من IL-10 هو سيتوكين منظم مناعي وظيفته الأساسية هي الحد من الاستجابات الالتهابية [6] ، مع خصائص قوية مضادة للالتهابات تلعب دورًا رئيسيًا في الحد من مناعة المضيف الاستجابة لمسببات الأمراض ، وبالتالي منع الضرر الذي يلحق بالعائل والحفاظ على التوازن الطبيعي للأنسجة [13]. وفقًا لـ De Smedt et al. [7] ، يلعب IL-10 دورًا أساسيًا في التحكم في الاستجابة المناعية ، وتحقيق التوازن بين الاستجابة بين Th1 و Th2 من خلال تنظيم تخليق السيتوكينات بواسطة الخلايا التي تقدم المستضدات وتقليلها ، وذلك يختلف عن العلاجات الأخرى. والتي ، عندما تكون غير متوازنة ، يمكن أن تشير إلى تثبيط مناعي لنظام الدفاع للطيور. لم تختلف العلاجات الأخرى إحصائيًا عن بعضها البعض.

تتضمن الاستجابة المناعية لمسببات الأمراض التنشيط السريع للسيتوكينات المؤيدة للالتهابات التي تعمل على بدء دفاع المضيف ضد الغزو الميكروبي. ومع ذلك ، يمكن أن يؤدي الالتهاب الزائد إلى اضطرابات التمثيل الغذائي والدورة الدموية الجهازية التي تضر بالمضيف. نتيجة لذلك ، تطور جهاز المناعة بالتوازي مع آليات تلف الأنسجة المضادة للالتهابات. وظيفة بيتا جلوكان الموجودة في Yes-Fix HP هي بشكل أساسي امتزاز السموم الفطرية ، وخاصة zearalenone [30]. علاوة على ذلك ، تُعرف β-glucans بأنها مُعدِّلات للجهاز المناعي ، وتعمل بشكل أساسي على الضامة ، مما يؤدي إلى تأثير مفيد ضد مجموعة متنوعة من البكتيريا والفيروسات والفطريات والطفيليات [19] ، والتي يمكن أن تقلل من إطلاق السيتوكينات المؤيدة للالتهابات [28] ].

نظرًا لعدم وجود b-glucans في الخلايا الحيوانية ، يُنظر إليها على أنها "غريبة" من قبل الجهاز المناعي وتعمل كنمط جزيئي مرتبط بالميكروبات (MAMP) ، والذي ينشط بشكل أساسي أعضاء المناعة الفطرية [26]. ومع ذلك ، فمن الجدير بالذكر أن السمات المعدلة للمناعة لهذه الجزيئات ، والتي تحفز الاستجابات التنظيمية بكثافة أكبر أو أقل ، ربما تكون مرتبطة بدرجة تنقيتها والتقنيات الحيوية المشاركة في عملية إنتاجها.

وفقًا لـ Zabriskie et al. [31] ، تعتمد آلية تنظيم المناعة التي يتوسطها بيتا جلوكان على تفاعلها مع الخلايا المناعية الموجودة في الأمعاء ، والتي تتعرف على السكريات القليلة هذه. ترتبط الاستجابة الالتهابية المفرطة بالإجهاد التأكسدي [15]. ينظم السيلينيوم تنشيط NF-B ، وهو عامل نسخ يلعب دورًا رئيسيًا في تنظيم مسارات الالتهاب [14]. يمكن للسيلينيوم أن يمنع NF-B من تشغيل الجينات المرتبطة بالالتهابات التي تقلل في النهاية من التعبير عن السيتوكينات المؤيدة للالتهابات [8]. قد تكون وظيفة Se المضادة للالتهابات ناتجة عن وجود بروتينات سيلين معينة ، مثل الجلوتاثيون بيروكسيديز (GPx) ، والتي تقلل التغيرات الالتهابية الناجمة عن الأكسدة في الكبد [18].

بالإضافة إلى β-glucan والسيلينيوم العضوي ، هناك خصوصية أخرى لتكوين Yes - Fix HP وهي وجود سيليمارين. السيليمارين هو منتج طبيعي ، يُستخرج من بذور وثمار نبات Silybum marianum (شوك الحليب) ، وتُعزى فعاليته إلى آليات مضادات الأكسدة ومضادات الالتهاب والمناعة التي تعمل على مسارات إشارات الخلايا المختلفة [25 ، 4]. وانج وآخرون. [29] لاحظ انخفاضًا في التعبير عن الإنترلوكينات المؤيدة للالتهابات مع إعطاء السيليمارين قبل التحدي مع السمية الكبدية الحادة التي يسببها ثلاثي الصبغيات. وفقًا لـ Esmaeila et al. [10] ، يثبط سيليمارين تنشيط عامل كاباب عن طريق قمع تحلل كابا ب (IκB) المثبط ويثبط الاستجابة الالتهابية ، والإجهاد التأكسدي. علاوة على ذلك ، سيليمارين ، عن طريق قمع مسارات إشارات STAT3 و ERK1 / 2 ، يمنع تكوين الورم ، وتكاثر الخلايا ، وهجرة الخلايا ، والتعبير الجيني لـ iNOS.

[التعبير الجيني النسبي IL-6 الجديد. الاحتمال <0.0001 1.5 | 1.0 | 0.5 | 0.0 الممتزات الثابتة التحكم HP التحكم مع السموم الفطرية الممتزات أ الممتزات ب]

[التعبير الجيني النسبي IL-10 أنوفا ، ف <0.0001 1.5 | 1.0 | 0.5 | 0.0 السيطرة مع mycotoxin الممتزات Fix HP رماص أ ماص ب]

شكل 1. التعبير الجيني لإنترلوكين IL-6 و IL-10 في اللوزتين الأعور لدجاج اللاحم يواجهان السموم الفطرية والممتزات المختلفة.

4. خاتمة المكملات مع الممتزات SIM - FIX HP® سمح بتعبير أكبر عن IL-10 ، والذي ربما يكون مرتبطًا بتكوينه ونتج عن التآزر بين مبادئه النشطة. بالإضافة إلى المواد الخام المسؤولة عن امتصاص السموم الفطرية الرئيسية الموجودة في هذا المجال ، تحتوي هذه المادة الممتزة على مبادئ معروفة للعمل المناعي ومضادات الأكسدة والالتهابات ، والتي يمكن أن تسهم في تعزيز صحة الحيوانات. مراجع 1. علي ، إي ، مدبولي ، ي. (2016). تأثير السموم الفطرية على الاستجابة المناعية للفروج للقاحات ND الحية المطبقة بطرق مختلفة. وسط شرق مجلة من مُطبَّق علوم، 06 (01), 51-58. 2. Arseniy EY ، Anton GK (2014). إنترلوكينز في سرطان مادة الاحياء: هُم غير متجانسة التمرير. إلسفير. لندن ، المملكة المتحدة: مطبعة أكاديمية ؛ كامبريدج ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية. 3. Bello RO و Chin VK و Abd Rachman Isnadi MF et al. (2018). دور ومشاركة ووظيفة (وظائف) إنترلوكين 35 وإنترلوكين 37 في إمراض المرض. دولي مجلة من جزيئي علوم. 19 (4). 4. بيجاك ، م. (2017). Silybin ، مكون رئيسي نشط بيولوجيًا من شوك الحليب (Silybum marianum L. Gaernt.) - الكيمياء والتوافر البيولوجي والتمثيل الغذائي. الجزيئات 22 ، 1-11. بورزيكي ، ب.

5. Borzecka A.، Chylinska-Wrzos P.، Lis-Sochocka M.، Wawryk-Gawda E.، Jodlowska-Jedrych. (2019). تقييم تركيز الانترلوكين 6 في كبد الفئران السويسرية البيضاء بعد التسمم بجرعات مختلفة من الباتولين. بالعملة. مشاكل فارم. ميد. علوم., 32 (1), 34-39. 6. Cho ، MJ ، Ellebrecht ، CT ، Payne ، AS (2015). الطبيعة المزدوجة للإنترلوكين -10 في الفقاع الشائع. سيتوكين, 73 (2), 335-341. 7. De Smedt، T.، van Mechelen، M.، De Becker، G.، Urbain، J.، Leo، O. and Moser، M. (1997). تأثير انترلوكين 10 على نضج الخلايا المتغصنة ووظيفتها. الأوروبي مجلة من علم المناعة. 27, 1229-1235. 8. دونتاس ، إل إتش (2012). الدور المتطور للسيلينيوم في علاج مرض جريفز واعتلال العين. ي غدة درقية الدقة, 736161. 9. Duke AG و Descoteaux A. (2014). سيتوكينات البلاعم: المشاركة في المناعة والأمراض المعدية. أمامي. إمونول, 5, 491. 10. إسماعيل ن. ، أناراكيب بس ، غراجزلوك م ، مؤيدية ب. (2017). يؤثر سيليمارين على جهاز المناعة باعتباره مُعدِّلًا للمناعة: مفتاح واحد للعديد من الأقفال. دولي علم الأدوية المناعي ، 50, 194-201.

11. هوفستيتر ، يو (2007). الآثار السلبية للسموم الفطرية المختلفة على الجهاز المناعي للدواجن. النشرة الإخبارية BIOMIN, 5-46. 12. هولندا ، DM ، كيم ، SW (2020). فعالية مزيلات السموم الفطرية على صحة ونمو الخنازير المفطومة حديثًا في ظل التحدي الغذائي المزمن للديوكسينيفالينول. السموم ، 12, 311. 13. آير ، إس إس ، تشينج ، جي (2012). دور تنظيم النسخ الانترلوكين 10 في الالتهاب وأمراض المناعة الذاتية. كريت ريف إمونول. 32 (1) ، 23-63 ، خان ، أريزونا 14. خان ، آيو ، خان ، س ... ران ل. (2019). تعمل البروبيوتيك المخصب بالسيلينيوم على تحسين حماية الكبد من خلال تنظيم السيتوكينات المؤيدة للالتهابات والقدرة المضادة للأكسدة في دجاج التسمين تحت ظروف الإجهاد الحراري مجلة البحوث البيطرية والحيوانية المتقدمة. 6 (3), 355-361. 15. Kim، SH، Oh، DS، Oh، J.Y، Son، TG، Yuk، D.Y، Jung، S. (2016). يمنع سيليمارين إصابات الكبد الحادة الناتجة عن الإجهاد عن طريق تخفيف الإجهاد التأكسدي وتقليل الاستجابة الالتهابية. الجزيئات 21,443. 16. Lauwers M ، Croubels S ، Letor B ، Gougoulias C ، Devreese M (2019). المؤشرات الحيوية للتعرض كأداة لاختبار فعالية مزيل السموم الفطرية في دجاج التسمين والخنازير. السموم ، 11, 187. 17. ليفاك ، KJ ، شميتجن ، TD (2001). تحليل بيانات التعبير الجيني النسبي باستخدام PCR الكمي في الوقت الحقيقي و 2 (-Delta C (T)) طريقة. أساليب، 25 (4), 402-8. 18. Liu Y و Liu Q و Ye G و Khan A و Liu J و Gan F وآخرون. (2015). التأثيرات الوقائية للبروبيوتيك المخصب بالسيلينيوم على تليف الكبد الناجم عن رابع كلوريد الكربون في الفئران. J غذاء زراعي كيم؛ 63, 242. 19. مانتوفاني إم إس ، بيليني إم إف ، أنجيلي جي بي ، أوليفيرا آر جيه ، سيلفا إيه إف ، ريبيرو إل آر (2008). بيتا جلوكان في تعزيز الصحة: الوقاية من الطفرات والسرطان. مؤتة 658 (3), 154-61. 20. Moore، KW، Waal Malefyt، R.de، Coffman، RL، & O'Garra، A. (2001). انترلوكين 10 ومستقبل انترلوكين 10. المراجعة السنوية لعلم المناعة ، 19, 683-765.

21. Ning X. ، Jian Z. ، Wang W. (2015). انخفاض مستويات المصل من إنترلوكين 35 في مرضى التهاب المفاصل الروماتويدي. Tohoku J. Exp. ميد ، 237, 77-82. 22. المجلس القومي للبحوث L. المتطلبات الغذائية للدواجن. الطبعة التاسعة. واشنطن العاصمة: الأكاديمية الوطنية للعلوم ، 1994. 154 ص. 23. Qu D. ، Huang X. ، Han J. ، Man N. (2017). فاعلية الممتزات المختلطة في التخفيف من تسمم ochratoxicosis في الدواجن التي تتغذى على ochratoxin A على العلائق الملوثة. إيطالي J Anim Sci. 16, 573-579. 24. Sattler N. ، Monroy R. ، Soldati T. (2013) التحليل الكمي للبلعمة ونضج البلعمة. في: Eichinger L. ، Rivero F. (eds) بروتوكولات Dictyostelium discoideum. طرق في علم الأحياء الجزيئي (طرق وبروتوكولات) ، المجلد 983. هيومانا برس ، توتووا ، نيوجيرسي. https://doi.org/10.1007/978-1-62703-302-2_21 25. شهبازي ، ف. ، دشتي خافيداكي ، س ، خليلي ، هـ ، ليسان بيزشكي ، م ، (2012). التأثيرات الواقية للكلية المحتملة للسيليمارين ضد الأدوية السامة للكلية: مراجعة الأدبيات. مجلة الصيدلة والعلوم الصيدلانية، 15, 112-123. 26. Soltanian، S.، Stuyven، E.، Cox، E.، Sorgeloos، P. and Bossier، P. (2009) Beta-glucans كمنشط مناعي في الفقاريات واللافقاريات. كريت. القس. ميكروبيول. 35, 109-138. 27. ترينشيري ، ج. (2007). إنتاج إنترلوكين -10 بواسطة الخلايا التائية المستجيبة: تظهر خلايا Th1 ضبطًا ذاتيًا. مجلة الطب التجريبي, 204 (2), 239-43. 28. Tzianabos، AO (2000). مناعة عديد السكاريد كعوامل علاجية: الجوانب الهيكلية والوظيفة البيولوجية. عيادة. ميكروبيول. 13, 523-533. 29. Wang L ، Huang QH ، Li YX ، وآخرون. التأثيرات الوقائية للسيليمارين على السمية الكبدية الحادة التي يسببها تريبتوليد في الفئران. مندوب مول ميد. 2018 ؛ 17 (1): 789-800. دوى: 10.3892 / mmr.2017.7958. 30. Yiannikouris A. ، Francois J. ، Poughon L. ، Dussap CG ، Bertin G. ، Jeminet G. ، Jouany JP (2004). امتزاز zearalenone بواسطة beta-D-glucans في جدار خلية Saccharomyces cerevisiae. J. FoodProt. 67, 1195-1200. 31. زابريسكي ، هانا أ ، جوليا سي بلومكيتيس ، جيسيكا م مون ، براد س.كرير ، رايلي ستيفان ، كايلا راتليف ، وتشاد إم كركسيك (2020). تعمل مكملات الخميرة بيتا جلوكان على تقليل علامات الالتهاب الجهازي بعد تمرين جهاز المشي الساخن. العناصر الغذائية، 12 (4), 1144.