Effekt av tillskott med organiska och oorganiska mineraler på prestanda, ägg- och spermiekvalitet och kläckningsegenskaper hos värphöns

Listor över innehåll tillgängligt på ScienceDirect Vetenskap om djurens reproduktion Webbplats för vetenskaplig publikation: www.elsevier.com/locate/anireprosci

1. Introduktion

Effektiviteten av att använda spårämnen är ett viktigt ämne i modern fjäderfänäring eftersom spårmineraler är viktiga för normal tillväxt och för många metaboliska processer i levande organismer, eftersom de är katalysatorer eller komponenter i enzymsystem i de flesta celler i kroppen (Swigtkiewicz et al. . ., 2014), inklusive ben- och äggskalsbildning, äggstruktur och utveckling av fågelembryon (Richards, 1997) och spermakvalitet (Barber et al., 2005).

De flesta mineralkällor som används i dieter för avelshöns kommer från oorganiska föreningar som oxider, sulfater, karbonater och fosfater. Organiska mikromineralkällor är ett alternativ till oorganiska källor. Organiska spårmineraler dissocierar inte när de befinner sig i ett medium med surt mag-pH, förblir neutrala i termer av elektroner och skyddade mot kemiska reaktioner med andra molekyler i tarmens lumen. Följaktligen sker optimering av absorption och större biotillgänglighet jämfört med oorganiska källor (Swiątkiewicz et al., 2014). Kelaterade eller komplexa mineraler har icke-metalliska ligander och är organiska (Vieira, 2008). Organiska föreningar innehåller en central metallatom (elektronacceptor) och innehåller även ligander (proteiner, aminosyror, kolhydrater eller lipider) med minst en atom (O, N eller S) med ett ensamt elektronpar (Swinkels et al. 1994).

De vanligaste organiska mineralerna inkluderar zink, mangan, selen, koppar och järn. Zink är en komponent i enzymet kolsyraanhydras, som är väsentligt för tillförseln av karbonatjoner under äggskalsbildning (Robinson och King, 1963). En zinkbrist i häckfågelns diet resulterar i lägre äggkläckningskapacitet, högre embryonal dödlighet (Kienholz et al., 1961) och lägre penetration av spermier i ägget (Amen och Al-Daraji, 2011). Mangan är den metalliska aktivatorn av enzymer som är involverade i syntesen av mukopolysackarider och glykoproteiner och som bidrar till bildningen av barkens organiska matris. Koppar spelar en väsentlig roll som en kofaktor för enzymet lysyloxidas, vilket är viktigt vid bildandet av kollagen mellan bindningarna som finns i äggskalsmembranet (Leeson och Summers, 2001). Järn är en komponent i hemoglobin och myoglobin och är involverat i oxidation, reduktion och elektrontransport, oumbärligt för de grundläggande fysiologiska processerna i en organism (Andrews, 2002). Selen verkar på antioxidantsystem, som är en komponent i selenoproteiner, och verkar direkt eller indirekt för att minska oxidativ stress (Moreira et al., 2001). Selen är ett av de viktigaste elementen i reproduktionsprocesser. En diet med brist på selen kan resultera i en minskning av antalet spermier, rörlighet och befruktningskapacitet.

Mikromineraler som zink (Zn), koppar (Cu), järn (Fe), mangan (Mn) och selen (Se) fungerar som katalytiska eller strukturella kofaktorer i enzymer och metallhaltiga proteiner som finns i cellerna hos embryon och deras extraembryonala membran. Dessa föreningar är faktorer som bidrar till embryots överlevnad. Det finns specifika kostkrav för varje essentiellt spårmineral för tillgänglighet under perioder av tillväxt och utveckling, när specifika spårmineraler krävs för utveckling av differentierade vävnader i embryon innan kläckning sker (Richards, 1997). O

Syftet med denna studie var att utvärdera effekten på prestation, äggkvalitet, variabler som påverkas av inkubation och spermiekvalitet av tillskott med kelaterade aminosyramineraler (koppar, järn, mangan och zink) och en proteinmetall (selen) i värphönsdieter och tuppar, formulerade med oorganiska mineraler.

2. Material och metoder

Den föreliggande studien utfördes vid Aviculture Laboratory-LAVIC vid Federal University of Santa Maria (UFSM). UFSM:s etiska kommitté godkände alla procedurer som används i denna studie. Totalt användes 144 vita Plymouth Rock värphöns och 36 Rhodes Island Red tuppar i åldern 36 till 55 veckor. Höns och tuppar fördelades i individuella burar som mätte 0,33 × 0,45 × 0,40 m respektive 0,33 × 0,60 × 0,60 m. Höns standardiserades efter vikt och äggproduktion innan experimentet påbörjades. Tuppar standardiserades efter kroppsvikt och fenotypiska egenskaper. Under försöksperioden inseminerades hönorna artificiellt en gång i veckan (0,05 ml sperma; Rosa et al., 1995). Sperma samlades in från Rhode Island Red tuppar som fick samma diet som hönsen. Mat och vatten tillhandahölls AD libitum🇧🇷 Fåglarna matades varje dag cirka klockan 08:00. Kycklingar fick en daglig ljuscykel på 16L:8D från 36 till 55 veckors ålder.

2.1. Behandlingar

Den experimentella designen var en helt randomiserad design med tre behandlingar, åtta replikat och sex kycklingar vardera. Totalt 12 tuppar per behandling placerades i separata burar och utfodrades med samma experimentdieter, där en tupp representerade en replikat. Källorna för organiska mikromineraler (OMM) var: Cu, Fe, Mg och Zn kelaterat med aminosyror. Mineraler kelerades med sojafoder, där aminosyramatrisen som användes var sojafoder som hade en ospecifik aminosyraprofil. Se levererades från en exklusiv jästprodukt med selen i form av metalloprotein (YesSinergy Agroindustrial Ltda.). Cu, Fe, Mg, Zn och Se i oorganisk form tillfördes genom matning av natriumselenit (Na₂Om₃), kopparsulfat (CuSO₄), järnsulfat (FeSO₄), manganoxid (MnO) och zinkoxid (ZnO) från steniga källor. Uppfödarhöns fick en basal diet baserad på soja och majsfoder vid 35 veckors ålder. Vid 36 veckor tilldelades tre experimentdieter till tuppar och höns: basaldiet (BD) som endast innehöll oorganiska mineralkällor (10 mg Cu, 60 mg Fe, 70 mg Mn, 75 mg Zn och 0,3 mg Se pr. kg diet), som beskrivs i tabell 1. BD bestod av 500 g organiska mineraler per ton diet (BD +500 g OMM) bearbetad med tillsats av 2,5 mg Cu, 17,5 mg Fe, 20 mg av Mn, 27,5 mg Zn och 0,08 mg Se/kg diet, och det fanns en BD till vilken 800 g OMM tillsattes per ton diet (BD +800 g OMM), inklusive 4 mg Cu, 28 mg Fe, 32 mg Mn 44 mg Zn och 0,128 mg Se per kg diet. BD, sammansatt av alla ingredienser och oorganiska mineraler, blandades i en horisontell mixer och experimentdieterna blandades i en annan horisontell mixer, med tillsats av tidigare bestämda mängder organiska mineraler. För varje diet rengjordes blandarna för att undvika kontaminering med ingredienser som inte borde ingå i kosten.

2.2. Höns prestanda och äggkvalitet

Ägg samlades in och antalet registrerades fyra gånger om dagen. Äggproduktionen av varje höna beräknades varje vecka. Dagligt foderintag (g/höna per dag), foderomvandling (kg foder/dussin producerade ägg och kg foder/kg producerade ägg) och kroppsvikt (BW) beräknades med 28 dagars intervall.

Äggvikt, äggulavikt, äggvitevikt, äggskalsvikt och specifik vikt bestämdes varje vecka, totalt 20 analyser under experimentperioden. Totalt 24 ägg från varje behandlingsgrupp (tre ägg för vart och ett av åtta replikat) användes i dessa analyser. Äggvikt, äggulavikt och äggvitevikt bestämdes med användning av en precisionsvåg (0,001 g). Äggen identifierade som

bord 1

Basaldietens sammansättning och näringsinnehåll i experimentdieter.

Ingredienser	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM
Majs (g/kg)	650.22	650.22	650.22
Sojafoder (460 g/kg protein) (g/kg)	241.73	241.73	241.73
Sojabönolja (g/kg)	1.49	1.49	1.49
Dikalciumfosfat (180 g/kg P; 210 g/kg Ca) (g/kg)	10.66	10.66	10.66
Kalksten (380 g/kg Ca) (g/kg)	81.88	81.88	81.88
Salt (g/kg)	4.00	4.00	4.00
Premix av oorganiska vitaminer och mineraler1 (g/kg) Organiska mineraler2	10.0	10.0	10.0
Kelaterad kopparaminosyra (mg/kg)	🇧🇷	2.5	4
Kelaterad manganaminosyra (mg/kg)	🇧🇷	20	32
Zinkaminosyrakelat (mg/kg)	🇧🇷	27.5	44
Kelaterad järnaminosyra (mg/kg)	🇧🇷	17.5	28
Selenjäst (mg/kg)	🇧🇷	0.08	0.128
Jod (mg/kg)3 Beräknad näringssammansättning (g/kg)	🇧🇷	0.6	0.96
Råprotein	17.00	17.00	17.00
Metaboliserbar energi (kcal/kg)	2768	2768	2768
Kalcium	35.0	35.0	35.0
Tillgänglig Fosfor	3.0	3.0	3.0
Analys av näringssammansättning (g/kg)
Råprotein	16.58	15.49	15.60
Bruttoenergi (kcal/kg)	3893	3958	3884
aska	14.38	13.29	15.69
Kalcium	33.5	33.4	33.3
Totalt fosfor (Totalt P)	5.1	5.1	5.1

¹Mineral- och vitaminpremix: Nivåer per kg diet (DSM Nutritional Products Ltd.): Vitamin A 1500 IE; vitamin D3 4500 IE; vitamin E 80 IE; vitamin K3 5 mg; vitamin B1 3,5 mg; vitamin B2 12 mg; vitamin B6 6 mg; vitamin B12 40 mcg; niacin 60 mg; pantotensyra 20 mg; biotin 0,4 mg; folsyra 3 mg; järn 60 mg; koppar 10 mg; zink 75 mg; mangan 70 mg; askorbinsyra 0,15 mg; selen 0,3 mg; jod 10 mg; metionin 1,04 g; fytas 600 FYT/g; kobolt 1 mg; enramycin 5 mg; lysin 0,15 g; Proteas 11250 Prot/kg.

• YesSinergy Brasil (Yes Minerals) 360 – Fåglar.
• Oorganisk jod (Ja mineraler) 360– Fjäderfä.

Intakta ägg utsattes för en utvärdering av specifik vikt med användning av metoden för nedsänkning av ägg i en saltlösning. Sju lösningar, med densiteter mellan 1070 och 1100 g/cm³med gradvisa variationer av 0,05 mellan lösningarna, framställdes. Specifik vikt bestämdes med hjälp av en densitometer och Archimedes' princip som beskrivs av Peebles och McDaniel (2004). Efter slutförandet av specifik viktbedömning användes prover på tre ägg per försöksenhet för att bestämma äggvitehöjden.

Mått i millimeter (mm) associerades med äggvikt, vilket bestämmer Haugh-enheten: 100* log (H − 1,7 W0,37 + 7,6)

H = där äggvitehöjd (mm) och W = äggvikt (g).

Gulans kvalitet bedömdes genom att mäta knopphöjd (YH) och knoppbredd (YW), och knoppindex (YI) beräknades som förhållandet mellan dessa parametrar som YI = YH/YW. De tre äggulorna och tre äggviteproverna blandades separat innan pH bestämdes med användning av en digital pH-mätare på bänken.

Äggskalen från den tidigare analysen användes för att bestämma tjockleken och vikten på skalen. Vikten och tjockleken på skalen bestämdes dock var 28:e dag (totalt fem analyser under hela försöksperioden). Äggskalet vägdes efter att ha torkats vid rumstemperatur i 72 timmar (RodriguezNavarro et al., 2002). Skal från tre ägg per experimentell enhet användes för att bestämma skaltjockleken med en 0,001 mm yttre elektronisk mikrometer vid tre punkter i ekvatorialzonen för varje ägg (Lin et al., 2004). Äggskalshållfastheten bestämdes med användning av en TA.XT2 Texture Analyzer texturometer med en 5 mm rostfri Cyln-sond (Texture Technologies Corp. och Stable Micro Systems Ltd., Hamilton, MA) på ytterligare tre ägg per replikat.

2.3. Tuppprestanda och spermiekvalitet

Dagligt foderintag (g/hane per dag) och kroppsvikt (BW) beräknades var 28:e dag. Sperma uppsamlades varannan vecka med användning av dorsal- och bukmassagemetoden, i graderade Falcon-rör placerade i ett vattenbad vid 37 ° C. Efter uppsamling kontrollerades ejakulationsvolymen, spermiernas rörlighet, kraft och spermie-pH. Spermiernas rörlighet bestämdes som procentandelen rörliga spermier (på ett rakt och progressivt sätt), och spermiernas rörlighet bestämdes baserat på motilitetsegenskaper (Celeghini et al., 2001). För denna analys avsattes 5 μL sperma på ett uppvärmt objektglas och observerades med optisk mikroskopi, med en förstoring på 200x. pH-värdet för färsk sperma bestämdes med hjälp av testremsor (MColorpHastTM; Merck Millipore, Billerica, MA, USA). För spermiekoncentration och morfologianalys sattes 5 μL sperma till 5 ml formalin:citratlösning. Att bestämma

spermiekoncentration späddes sperman ut i förhållandet 1:1000 och spermieräkningen utfördes med hjälp av en hemocytometer (Neubauer Chamber) med ett resultat uttryckt i antal celler per mm³ av sperma enligt den teknik som beskrivs av Brillard och McDaniel (1985). Resultatet omvandlades till antalet celler per ml sperma. Totalt 100 spermier utvärderades med hjälp av oljedoppning med hjälp av ett faskontrastmikroskop (1000x förstoring), och spermatozoerna klassificerades som normala eller onormala strukturer (kategoriserade i huvud-, mitt- och svansavvikelser) och den totala procentandelen normala eller onormala spermier beräknades.

2.4. Inkubationsvariabler

För att utvärdera kläckbarhet, kläckbarhet av fertila ägg, fertilitet, embryonal dödlighet, punkterade ägg, kycklingkvalitet och vikt, inkuberades ägg varje vecka (totalt 20 inkubationer). Endast friska ägg utan synliga avvikelser användes för inkubation. Alla ägg som samlades in dagligen klassificerades och separerades för inkubation för varje experimentgrupp. De ägg som ansågs lämpliga för kläckning lagrades under en period av högst 7 dagar i ett temperaturkontrollerat rum (18–20°C och 75%–80% RH (relativ fuktighet)). Inkubation utfördes i en kommersiell flerstegsinkubator (Casp, Amparo, SP, Brasilien) vid 37,5°C och 60% RH. Efter 18 dagar överfördes äggen till inkubationsutrustningen, som kalibrerades vid 36,5°C och 65% RH. Inkubationshastigheten bestämdes i förhållande till det totala antalet inkuberade ägg. Fertilitet avser andelen kläckta ägg som var fertila, medan kläckbarhet är andelen fertila ägg som kläckts. Kycklingar avlägsnades från inkubatorn, vägdes och klassificerades i första och andra kvalitet. Kycklingar ansågs vara andra kvalitet när det fanns en navel, näbbavvikelser, svaghet eller hängande nedre extremiteter och alltför våta fjädrar. För att bedöma kläckningshastigheten, fertiliteten och embryonal dödlighet för fertila ägg, äggen från vilka

inkubation inte skedde underkastades embryonal diagnostik. I denna utvärdering klassificerades äggen, med hjälp av makroskopiska visuella undersökningar, som infertila eller som: Embryomatalitet inträffade under de första 48 timmarna av inkubationsperioden (EM1); Embryodödlighet som inträffar mellan den 3:e och 7:e dagen av inkubationsperioden (EM2), Embryodödlighet som inträffar mellan den 8:e och 14:e dagen av inkubationsperioden (EM3); Embryodödlighet inträffade under de 15:e och 21:a dagarna av inkubationsperioden (EM4); och perforerade ägg – de där embryona har brutit skalet, men från vilka embryon inte har dykt upp när kycklingarna togs bort från inkubationsutrustningen men med embryona fortfarande vid liv.

2.5. Experimentell design och statisk analys

Den experimentella designen var en helt randomiserad design med tre behandlingar av åtta replikat utförda med sex kycklingar. Utfodrade med samma dieter som hönsen användes 12 tuppar per behandling, där en tupp representerade en upprepning. Varje tupp representerade en upprepning. Alla data utsattes för en variansanalys. Varje variabel utvärderades för normalitet och variansheterogenitet innan ANOVA utfördes. När det fanns betydande skillnader i P < 0,05 Tukeys test användes för jämförelse mellan behandlingar. Statistiska procedurer utfördes med hjälp av SAS Institute (2016).

3. Resultat

3.1. Höns prestanda och äggkvalitet

Data om äggproduktion ingår i tabell 2. Äggproduktionen var högre i BD +800 g OMM-behandlingsgruppen än i kontrollgruppen (BD) vid veckorna 43, 44, 45 och 49 (P = 0.0275, P = 0.0065, P = 0,0112 och P = 0,0285 respektive), och under de andra veckorna fanns en trend mot högre äggproduktion från höns som utfodrats med BD 800 g OMM jämfört med BD. Denna trend observerades också för den totala periodens medelvärde med höns utfodrade med BD + 800 g OMM (79.72%) med en högre genomsnittlig äggproduktion än höns som utfodrats med BD (75.68%). BW och foderintag påverkades inte av kosten av organiska mikromineraler (P > 0,05; data visas inte). Foderomvandling kg/kg (BD, 2,59; BD + 500 g OMM, 2,45 och BD + 800 g OMM, 2,51) och kg/d (BD, 1,86; BD + 500 g OMM, 1,74 och BD + 800 g OMM, 1,76 ) påverkades inte på grund av införandet av OMM i dieterna

(P > 0,05; data visas inte). Vikt av ägg (P = 0,2863), äggula vikt (P = 0,9634), albuminvikt (P = 0,1692), äggskalsvikt (P = 0,3337), specifik vikt (P = 0,3731), Haugh-enhet (P = 0,9581), äggula pH (P = 0,6171), albumin pH (P = 0,6989), äggskalstjocklek (P = 0,5150) och skalstyrka (P = 0,7979) påverkades inte på grund av inkluderingen av OMM i dieterna (tabell 3). Guleindexet var högre i ägg (P = 0,0092) från kycklingar som utfodrats med BD än i ägg från kycklingar som utfodrats med BD + 800 g OMM (tabell 3).

3.2. Tuppprestanda och spermiekvalitet

Tillskott med organiska mineraler påverkade inte BW och foderintag bland tuppar (P > 0,05; data visas inte). Data för tuppspermakvalitet ingår i tabell 4. Spermavolym (P = 0,1054), spermiemotilitet (P = 0,4608), spermiekoncentration (P = 0,7550), totalt antal onormala spermier (P = 0,4650), abnormitet i strukturen av spermiehuvudet (P = 0,4650), abnormitet i strukturen av spermiernas mittstycke (P = 0,6421), och abnormitet i spermiernas svansstruktur (P = 0,3174) påverkades inte av införandet av OMM i kosten. Semen pH-värden (P = 0,6402) varierade från 7,0 till 8,0, utan skillnader mellan behandlingarna. Det fanns ingen effekt av organiskt mineraltillskott på spermans pH. Spermikraften var högre (P = 0,0262) för tuppar utfodrade BD + 800 g OMM än bland tuppar som utfodras med BD.

Tabell 2

Äggproduktion av värphöns utfodrade dieter innehållande organiska mikromineraler¹.

Ålder (veckor)	Behandlingar
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	UTAN*	P-värde
36	75,59 ± 2,17	74,13 ± 2,17	77,38 ± 2,17	6.15	0.1370
37	75,00 ± 1,51	77,38 ± 1,51	75,85 ± 1,61	4.28	0.5418
38	82,73 ± 1,94	83,63 ± 1,94	87,50 ± 1,94	5.49	0.2072
39	82,14 ± 2,26	80,35 ± 2,26	86,60 ± 2,26	6.39	0.1565
40	80,19 ± 3,05	81,94 ± 3,05	83,03 ± 3,05	8.65	0.8043
41	78,87 ± 2,49	80,65 ± ± 2,49	85,41 ± ± 2,49	7.06	0.1838
42	80,65 ± 3,08	83,92 ± 3,08	80,65 ± 3,08	8.71	0.6910
43	76.48 B ± 1,87	77.21 ab ± 2,00	83.63 a ± 1,87	5.30	0.0275
44	77.21 B ± 1,64	77.67 B ± 1,53	84.69 a ± 1,64	4.34	0.0065
45	71.72 B ± 2,51	75.89 ab ± 2,51	84.01 a ± 2,69	7.12	0.0112
46	77,21 ± 2,94	77,38 ± 2,75	78,57 ± 2,75	7.78	0.9321
47	74,40 ± 3,35	76,48 ± 3,35	75,26 ± 3,35	9.49	0.9077
48	75,59 ± 3,04	75,59 ± 3,04	82,27 ± 3,04	8.62	0.2254
49	72.02 B ± 2,47	77.97 ab ± 2,47	82.14 a ± 2,47	6.98	0.0285
50	73,47 ± 3,07	77,38 ± 2,87	76,19 ± 2,87	8.12	0.6449
51	72,91 ± 1,71	74,70 ± 1,71	77,97 ± 1,71	4.85	0.1317
52	72,79 ± 2,58	77,67 ± 2,42	77,68 ± 2,42	6.84	0.3104
53	77,21 ± 2,64	74,10 ± 2,47	73,51 ± 2,47	7.01	0.5653
54	71,27 ± 2,75	73,80 ± 2,75	73,80 ± 2,75	7.79	0.7581
55	66,96 ± 3,15	72,91 ± 3,15	72,91 ± 3,15	8.91	0.3245
Medium (36–55 veckor)	75,72 ± 1,53	77,53 ± 1,53	79,95 ± 1,53	4.33	0.1976

^{De 🇧🇷 B} Medelvärdena i rad, utan att dela ett gemensamt index, är olika (P ≤ 0,05).

¹ Data representerar medelvärdet av åtta replikat (dvs avdelningar) per behandling; *UTAN aggregat, n = 8.

Tabell 3

Värden för variabler associerade med äggkvalitet från 36 till 55 veckor gamla höns¹.

Variabler	Behandlingar
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	UTAN*	P-värden
Vikt av ägg (g)	59,95 ± 0,55	59,22 ± 0,59	58,67 ± 0,55	1.57	0.2863
Gulans vikt (g)	16,69 ± 0,16	16,72 ± 0,17	16,66 ± 0,16	0.47	0.9634
Albumen vikt (g)	38,03 ± 0,40	37,24 ± 0,43	36,94 ± 0,40	1.13	0.1692
Vikt av äggskal (g)	5,22 ± 0,07	5,24 ± 0,07	5,10 ± 0,07	0.20	0.3337
Specifik vikt (g/cm³)	1083,9 ± 0,52	1084,8 ± 0,56	1083,7 ± 0,52	1.49	0.3731
hög enhet	95,01 ± 0,42	94,92 ± 0,45	94,84 ± 0,42	1.19	0.9581
ädelstensindex	0.443 a ± 0,00	0.441 ab ± 0,00	0.436 B ± 0,00	0.93	0.0092
äggula pH	5,92 ± 0,01	5,94 ± 0,01	5,93 ± 0,01	0.03	0.6171
albumin pH	8,34 ± 0,03	8,30 ± 0,03	8,31 ± 0,03	0.09	0.6989
Tjocklek på äggskal (mm)	0,373 ± 3,67	0,377 ± 3,93	0,371 ± 3,67	10.40	0.5150
Skalstyrka (N)	35,79 ± 1,09	35,07 ± 1,16	34,78 ± 1,09	3.08	0.7979

^{De 🇧🇷 B} Medelvärdena i rad, utan att dela ett gemensamt index, är olika (P ≤ 0,05).

1 Data representerar medelvärden för åtta replikat (dvs avdelningar) per behandling; *UTAN aggregat, n = 8.

3.3. Effekter på variabler associerade med embryonal och äggutveckling under inkubation

Kläckningskapacitet (P = 0,3527), inkubationskapacitet för fertila ägg (P = 0,0750), total embryonal dödlighet (P = 0,7347) i EM1 (P = 0,8002), EM2 (P = 0,3548), EM3 (P = 0,3548) och EM4 (P = 0,5959) påverkades inte av inkluderingen av OMM i dieterna. Även antalet perforerade ägg (P = 0,4929), antal kycklingar av andra kvalitet (P = 0,6450) och fågelvikt (P = 0,2866) påverkades inte av inkluderingen av OMM i dieterna. Fertiliteten var högre (P = 0,0130) bland kycklingar i grupperna som fick BD + 500 g OMM och BD + 800 g OMM än bland kycklingar som fick BD. (Tabell 5).

4. Diskussion

4.1. Variabler förknippade med höns och äggkvalitet

Olika mikromineraltillskott påverkade inte värdena på variabler associerade med prestanda, förutom för äggproduktion. Fynden att äggproduktionen var högre när BD +800 g OMM gavs än BD under veckorna 43, 44, 45 och 49 och att det fanns en trend mot högre äggproduktion under de andra veckorna då kosten kompletterades med OMM är oförenliga med resultat för äggproduktion från en tidigare studie (Carvalho et al., 2015). I denna tidigare studie fanns det ingen

Tabell 4

Tuppspermiekvalitet under experimentperioden (36–55 veckors ålder)¹.

Variabler	Behandlingar
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	UTAN*	P-värden
Volym (ml)	1,21 ± 0,08	0,96 ± 0,08	0,98 ± 0,08	0.30	0.1054
Motilitet (%)	89,30 ± 1,09	89,13 ± 1,09	90,90 ± 1,09	3.79	0.4608
Tvinga2	3.91 B ± 0,08	4.16 ab ± 0,08	4.21 a ± 0,08	0.27	0.0262
pH	7,98 ± 0,02	7,98 ± 0,02	7,95 ± 0,02	0.07	0.6402
Koncentration3	3,89 ± 0,19	3,74 ± 0,19	3,69 ± 0,19	0.67	0.7550
TAS (%)	4,97 ± 0,51	4,24 ± 0,51	5,08 ± 0,51	1.79	0.4650
AH (%)	2,21 ± 0,24	1,98 ± 0,24	2,38 ± 0,24	0.84	0.5212
AIP (%)	2,35 ± 0,25	2,08 ± 0,25	2,41 ± 0,25	0.89	0.6421
AT (%)	0,31 ± 0,05	0,30 ± 0,05	0,21 ± 0,05	0.18	0.3174

^{De 🇧🇷 B} Medelvärdena i rad, utan att dela ett gemensamt index, är olika (P ≤ 0,05). ¹ Data representerar medelvärdet av 12 replikat (dvs avdelningar) per behandling; *UTAN aggregat, n = 12. ²Spermier Vigor (poäng 1–5).

³ Spermiekoncentration (antal celler x 10⁹ ml sperma).

TAS = Total spermieavvikelse, AH = huvudavvikelse, AIP = Avvikelse i mitten, AT = svansavvikelse.

Tabell 5

Reproduktionssvar (%) utvärderade under försöksperioden med 36–55 veckor gamla värphöns¹.

Variabler	Behandlingar
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	UTAN*	P-värden
inkubationskapacitet	84,47 ± 1,63	85,15 ± 1,63	87,72 ± 1,63	4.63	0.3527
Kläckningsförmåga hos fertila ägg	92,64 ± 0,92	89,94 ± 0,92	92,73 ± 0,92	2.61	0.0750
Fertilitet	90.98 B ± 1,05	95.08 a ± 1,05	95.54 a ± 1,13	2.99	0.0130
Total embryonal dödlighet	5,62 ± 0,81	6,53 ± 0,81	6,02 ± 0,81	2.30	0.7347
EM12	1,54 ± 0,34	1,56 ± 0,34	1,83 ± 0,34	0.98	0.8002
EM23	1,06 ± 0,26	1,39 ± 0,26	0,84 ± 0,26	0.75	0.3548
EM34	1,12 ± 0,22	1,24 ± 0,22	0,84 ± 0,22	0.65	0.4723
EM45	1,89 ± 0,42	2,33 ± 0,42	2,49 ± 0,42	1,21	0.5959
perforerad	1,27 ± 0,33	1,63 ± 0,33	1,06 ± 0,33	0.95	0.4929
andra kvalitet kycklingar	1,60 ± 0,35	1,27 ± 0,35	1,74 ± 0,35	1.01	0.6450
Kycklingarnas vikt (g)	41,46 ± 0,35	41,55 ± 0,35	40,79 ± 0,35	1.00	0.2866

^{De 🇧🇷 B} Medelvärdena i rad, utan att dela ett gemensamt index, är olika (P ≤ 0,05).

¹ Data representerar medelvärdet av åtta replikat (dvs avdelningar) per behandling; *UTAN aggregat. n = 8, Inkubationer per vecka, totalt: 20.

²EM1 = embryonal dödlighet under de första 48 timmarna av inkubationen.

³EM2 = embryonal dödlighet inträffade mellan d 3 och 7 av inkubationen.

⁴EM3 = embryonal dödlighet inträffade mellan d 8 och 14 av inkubationen.

⁵EM4 = embryonal dödlighet inträffade mellan d 15 och 21 av inkubationen.

effekt på äggproduktionen hos värphöns när en blandning av organiska spårmineraler (Cu, Fe och Mn kelaterade med aminosyror och delvis hydrolyserade proteiner) inkluderades i basalien som ersatte 100%, 90%, 80% eller 70% av de oorganiska mineralerna.

Kirchgessner och Grassmann (1970) rapporterade att organiska mineraler bildar stabila komplex, vilket minskar möjligheten att bilda utfällda salter med föreningar som fytinsyra eller olösliga fibrer.

Organiska mikromineraler är därför mer tillgängliga för biologiska funktioner på grund av större löslighet och absorption när de är i organisk form, med en underlättande av dessa processer av de organiska bindande komponenterna. I den aktuella studien skedde en ökning av äggproduktionen med användning av organiska mikromineraler, vilket kan vara relaterat till dessa positiva egenskaper hos OMM ur löslighets- och absorptionsperspektiv. De andra variablerna associerade med prestationsförmågan var opåverkade, vilket kunde förväntas eftersom den basala dieten som användes för alla behandlingar redan var balanserad för att möta hönsens krav på dessa mikronäringsämnen.

Äggkvaliteten påverkades inte av kosttillskott med OMM. Detta fynd stämmer överens med resultaten från en tidigare studie (Stefanello et al., 2014) där en bedömning av äggkvalitet gjordes. I den tidigare studien fick värphöns mellan 47 och 62 veckors ålder dieter kompletterade med en organisk källa (proteinater) av spårmineraler (Mn, Zn och Cu), och det fanns ingen effekt på äggets specifik vikt. Saldanha et al. (2009) utvärderade effekten av

tillskott med organiska mineraler (Zn, Fe, Mn, Cu, I och Se). I denna tidigare studie fanns ingen effekt av dessa tillskott på äggkvaliteten hos värphöns (83 veckor gamla), och det fanns ingen effekt av behandlingar på gula och äggviteprocent. I den tidigare studien fanns det dock en effekt på den specifika vikten hos ägg och på andelen skal när 80% av organiska mikromineraler inkluderades för att ersätta de oorganiska mineralerna. Garcia et al. (2010) rapporterade att ett alkaliskt pH negativt påverkar vitellinemembranet. Även alkaliska joner i albumin, såsom Na, K och Mg, kan transporteras från äggviten till äggulan. Migrationen av alkaliska joner kan leda till en omordning med

vätejoner som finns i äggulan, vilket kan leda till en ökning av äggulas pH. Denna pH-förändring kan leda till en denaturering av proteinet i äggulan, vilket ökar äggulans viskositet. I den föreliggande studien påverkade inte införandet av OMM i hönsfoder pH-värdet för gulan och äggviten, därför borde det inte finnas problem av denna typ om det fanns införande av OMM i värphönsfoder. Mycket lite forskning har utförts med avelsfåglar som används för produktion av värphöns, vilket gör det svårt att jämföra resultat mellan studier.

Källor till organiska mineraler som användes var för sig eller tillsammans påverkade inte värden för Haugh-enheter (Saldanha et al., 2009; Yenice et al., 2015) eller ädelstensindex (Saldanha et al., 2009). I den aktuella studien påverkades inte värdena för Haugh-enheten av tillsatsen av organiska mineraler i kosten, men äggulaindexet var högre bland fåglar som fick BD än BD +800 g OMM. När äggen försämras blir äggulaindexpoängen lägre eftersom fiberstrukturen i vitellinemembranet lossnar och membranets styrka minskar (Fromm, 1967). I den aktuella studien var ägguleindexvärdena bland höns utfodrade BD (endast oorganiska mineraler) högre än guleindexvärdena bland höns utfodrade BD +800 g OMM; det vill säga, knopparna visade en större membranfiberstruktur. Ändå höll sig värdena för guleindex för alla behandlingsgrupper inom vad som anses lämpligt för ägg från värphöns, vilket skulle vara mellan 0,3 och 0,5 (Yannakopoulos och Tservenigousi, 1986).

I den aktuella studien fanns det ingen skillnad i tjocklek och motståndskraft hos äggskalen på grund av de behandlingar som påfördes. Dessa resultat av den föreliggande studien överensstämmer med de av Mabe et al. (2003), där utvärderingar av kosttillskott med Zn, Cu och Mn gjordes bland värphöns, och det fanns ingen effekt på äggskalskvaliteten: skalprocent eller skalindex. I den tidigare studien var det större motståndskraft mot äggbrott och motståndskraft mot frakturer, vilket inte stämmer överens med resultaten av denna studie. Swiatkiewicz och Koreleski (2008) utvärderade tillsatsen av Zn och Mn från organiska och oorganiska källor bland värphöns mellan 35 och 70 veckor gamla, och rapporterade att det inte fanns någon förändring i procent och tjocklek av äggskal.

De observerade effekterna på de mekaniska egenskaperna hos äggskal indikerar att mikroelement kan interagera direkt under kalciumkarbonatbildningsprocesser genom att påverka skalets struktur. Närvaron av mikroelement förändrar den initiala fasen av skalbildning (Mabe et al., 2003). Bain (1990) undersökte sambandet mellan sprickförmåga och skalets ultrastrukturella organisation, och föreslog att tillskott med mikroelement främjar tidig smältning under de inledande stadierna av skalbildning och därmed förbättrar äggets mekaniska styrka oavsett dess tjocklek. Denna effekt kan förklara frånvaron av skillnader i termer av vikt och tjocklek på skalen som observerats i denna studie.

4.2. Effekter på tuppar och spermiekvalitet

Spermievolymen hos tuppar var inte olika mellan behandlingsgrupperna. Shan et al. (2017) utvärderade dock effekten av en förblandning av oorganiska och organiska mikromineraler (Zn, Mn, Cu, Fe och Se) på spermakvaliteten bland hankycklingar för uppfödning vid 31 till 35 veckor, och drog slutsatsen att det fanns en ökning av värden för variabler associerade med sperma, såsom volym och densitet, bland tuppar som matats med organiska mineraler. Organiska mineraler (Cu, Zn, Mn och Se) tillhandahölls av Mahan et al. (2002) och läggs till dieterna för att bedöma galtens fertilitet, och resultaten indikerade att antalet spermadoser som kunde användas för artificiell insemination genom utlösning ökade från 10,9 till 23,4. Barber et al. (2005) föreslog, baserat på forskningsresultat med avelstuppar, att mikromineraler (Se, Mn och Zn) utövar funktioner på reproduktiva vävnader under spermatogenes för att förbättra spermakvaliteten.

Enligt Surai et al. (1998), Se-tillskott påverkar antioxidantstatusen hos tuppsperma. Edens (2002) rapporterade att när kycklingar matades med en basal diet innehållande 0,28 ppm oorganiskt Se, var andelen normala spermier endast 57,9%, med två viktiga abnormiteter, böjda mittstycken (18,7%) och korkskruvshuvuden (15,4%). När organiskt Se däremot ingick i dieten av slaktkycklingar i samma mängd, förbättrades spermakvaliteten ännu mer och dessa avvikelser minskade till 0,7% och 0,2%, och andelen normala spermier ökade till 98,7%. Resultaten av dessa studier tyder på att inkludering av selen i fjäderfädieter resulterar i ökat spermieantal, och att använda en organisk källa leder till en minskning av andelen defekta spermier, vilket har en positiv effekt på hanarnas befruktningsförmåga. I den aktuella studien var spermiekoncentrationen och avvikelserna mellan spermier desamma när organiska och oorganiska mineraler matades. Trots detta överensstämmer resultaten av föreliggande studie med resultaten från de tidigare studierna som beskrivits ovan. Även om det inte fanns någon effekt på värdena för dessa variabler, var spermiekraften större bland män som fick BD +800 g OMM än bland de som fick BD utan inkludering av OMM. Dessutom var fertiliteten hos inkuberade ägg högre när OMM inkluderades i hönsfoder (diskuteras senare i detta manuskript).

Ökningen av spermiecellernas kraft kan vara relaterad till resultaten som rapporterats av Renema (2004). I den här tidigare studien hade avelshöns som utfodrats med ekologisk Se ett högre antal spermiehål vid befruktningspunkten i det perivitellina membranet jämfört med höns som matades med oorganiskt Se. Denna effekt tillskrevs förändringar i den oviduktala miljön, såsom en minskning av fria radikaler i spermavärdkörtlar, på grund av ökad glutationperoxidas (GSH-Px) aktivitet.

Andra spårmineraler som är relevanta för spermiekvalitet är Mn, Cu och Zn. Mn och Cu är kraftfulla stimulatorer av spermiers rörlighet (Lapointe et al., 1996). Amen och Al-Daraji (2011) rapporterade att zink är viktigt för celldelning och produktion av livskraftiga spermier, och det är det viktigaste mikromineralet för handjurens reproduktionsfunktioner. Testosteronmetabolism är nödvändig för testikeltillväxt, spermieproduktion och spermiemotilitet. I denna tidigare studie (Amen och AlDaraji, 2011) utvärderades en utvärdering av effekten av kosttillskott med olika koncentrationer av Zn på slaktkycklingshöns, och det var en större penetration av ägg av spermier jämfört med när det inte fanns något Zn-tillskott. Shan et al. (2017) rapporterade att det fanns en ökning av spermiers rörlighet och antalet normala spermier bland avelstuppar som matades med en organisk mikromineralförblandning än bland tuppar som fick en oorganisk mineralförblandning vid 31 till 35 veckors ålder. I den aktuella studien påverkades inte spermiers rörlighet och antalet onormala spermier av utfodring med organiska mineraler. Ytterligare forskning om spermiekvalitet bland tuppar skulle kunna göras för att belysa effekterna av att använda mineraler i organisk form.

A. Londero, et al. 🇧🇷 Animal Reproduction Science 215 (2020) 106309 4.3. Effekter på variabler under inkubation

Fertiliteten var högre bland avelshöns som utfodrats med OMM jämfört med höns som utfodrats med BD i denna studie. Dessa resultat överensstämmer med resultaten av Rutz et al. (2003), där det rapporterades att tillskott med organiska mineraler (Se-0,2 ppm, Zn-30 ppm och Mn-30 ppm) i dieten av slaktkycklingshöns ökade fertiliteten jämfört med utfodring med oorganiska former (Se0,3 ppm) Zn-100 ppm och Mn-100 ppm). Ökningen av äggfertilitet kan tillskrivas en större användning av mineraler som är involverade i befruktningen, såsom Zn, Mn, Cu och Se. Emellertid Yanice et al. (2015) utvärderade effekten av tillskott med organiska och oorganiska blandningar av Mn, Zn, Cu och Cr (kelaterat till metionin), och rapporterade att det inte fanns någon skillnad mellan grupperna vad gäller befruktade ägg och kläckningshastigheter.

Sun et al. (2012) rapporterade att med tillskott av organiska mineraler i kosten, finns det skydd av avelshönsen mot lipidperoxidation, större retention av näringsämnen i äggen och större tillväxt av den efterföljande broileravkomman. I den aktuella studien påverkade inte OMM-tillskott i hönsdieter embryodödlighet och kvaliteten på kläckta kycklingar. Kycklingar av andra kvalitet (ohälsosamma navlar, slaktade och med fysiska avvikelser) och kycklingvikt (kycklingar av hög kvalitet) påverkades inte av behandlingar.

Spårmineralerna Zn, Mn och Cu spelar viktiga roller i embryoutveckling, såväl som ägg kläckbarhet (Kidd et al., 1992), och det finns ett positivt samband mellan Zn-innehåll i ägg och ägg kläckningsförmåga hos kläckningsägg. Testosteronmetabolism måste ske för normal testikeltillväxt, spermieproduktion, rörlighet och spermieantal, med relativt sett mindre östrogen i reproduktionsvävnaden hos handjur (Amen och Al-Daraji, 2011). Komplettering av värphönsfoder med organiskt selen förbättrar kläckbarheten hos befruktade ägg (Hanafy et al., 2009) och procentandelen fertilitet och kläckbarhet (Osman et al., 2010). Som tidigare beskrivits i detta manuskript finns det positiva roller för mineraler i reproduktionsprocesserna hos avelshöns, vilket bekräftades i den aktuella studien på grund av ökningen av äggens fertilitet, även om det inte fanns någon effekt på kläckbarheten av dessa ägg.

5. Slutsatser

Sammanfattningsvis, i den aktuella studien kan tillskott med Mn, Zn, Fe, Cu och Se användas för värphöns utan att påverka de primära variablerna associerade med prestation och äggkvalitet. Det fanns en positiv effekt med tendensen att öka äggproduktionen bland fåglar som matades med ekologiska mikromineraler under hela försöksperioden. Äggs fertilitet var högre med OMM-matning. Bland tuppar resulterade OMM-matning i ökad spermiekraft utan att ändra värden för de andra spermaassocierade variablerna som utvärderades.

Finansiering

Det fanns inga specifika bidrag från offentliga, kommersiella eller icke-vinstdrivande finansieringsorgan för den forskning som rapporteras i detta manuskript.

Förklaring om intressekonflikter

Vi, forskare från Federal University of Santa Maria, förklarar att det inte finns någon intressekonflikt i denna publikation, eftersom vi är medvetna om allvaret och korrekt uppförande av Animal Reproduction Science-publikationen.

Referenser

Amen, MHM, Al-Daraji, HJ, 2011. Effekt av kosttillskott med olika nivåer av zink på spermieäggpenetration och fertilitetsegenskaper hos slaktkycklingar. Pak. J. Nutri. 10, 1083-1088.

Andrews, NC, 2002. Metalltransportörer och sjukdomar. Curr. åsikt chem. Biol. 6, 181–186.

Bain, MM, 1990. Äggskalsstyrka: en mekanisk/ultrastrukturell utvärdering. Fakulteten för veterinärmedicin, University of Glasgow 266s. Barber, SJ, Parker, HM, McDaniel, CD, 2005. Broileruppfödares spermakvalitet påverkad av spårmineraler in vitro. Poult. Sci. 84, 100–105.

Brillard, JP, McDaniel, GR, 1985. Tillförlitligheten och effektiviteten hos olika metoder för att uppskatta koncentrationen av spermier. Poult. Sci. 64, 155-158.

Carvalho, LSS, Rosa, DRV, Litz, FH, Fagundes, NS, Fernandes, EA, 2015. Effekt av införandet av organisk koppar, mangan och zink i kosten av lager på mineralutsöndring, äggproduktion och äggskalskvalitet. Braz. J. Poult. Sci. 087–092.

Celeghini, ECC, Albuquerque, R., Arruda, RP, Lima, CG, 2001. Utvärdering av sädesegenskaper hos tuppar som valts ut för avel genom kamutveckling. Braz. J. Vet. Res. animering Sci. 38, 177-183.

Edens, FW, 2002. I: Lyons, TP, Jacques, KA (red.), Practical Applications for Selenometionine: Broiler Breeder Reproduction. I: Nutritional Biotechnology in the Feed and Food Industries. Uppdrag från 18:e Alltechs årliga symposium. Nottingham University Press, Nottingham, Storbritannien, s. 29–42.

Fromm, D., 1967. Vissa fysiska och kemiska förändringar i hönsäggets vitellinemembran under lagring. J. Food Sci. 32, 52–56.

Garcia, ERM, Olandi, CCO, Oliveira, CAL, Cruz, FK, 2010. Kvalitet på ägg från värphöns lagrade vid olika temperatur och lagringsförhållanden. Varv. BH:ar. Health Prod. animering 11, 505–518.

Hanafy, MH, El-Sheikh, AMH, Abdalla, EA, 2009. Effekten av organiskt selentillskott på produktiv och fysiologisk prestation i en lokal kycklingstam. Effekten av organiskt selen (Sel-PlexTM) på produktiva, reproduktiva och fysiologiska egenskaper hos bandarah lokal stam. Egypten. Poult. Sci. J. 29, 1061-1084.

Kidd MT, Anthony NB, Johnson Z., Lee SR, 1992. Effekt av zinkmetionintillskott på prestanda hos mogna broileruppfödare. J. Appl. Fjäderfä Res. 1, 207-211.

Kienholz EW, Turk DE, Sunde ML, Hoekstra WG, 1961. Effekter av zinkbrist i dieter av höns. J. Nutri. 75, 211-221.

Kirchgessner, M., Grassmann, E., 1970. Kopparabsorptionens dynamik. I: MILLS, CF (Ed.), Trace Elements Metabolism in Animals. Academic Press, Edinburgh, s. 277–287.

Lapointe, S., Ahmad, I., Buhr, MM, 1996. Modulering av motilitet efter upptining, överlevnad, kalciumupptag och fertilitet hos bovina spermier genom magnesium och mangan. j.

Dairy Sci. 12, 2163-2169.

Leeson, S., Summers, JD, 2001. Nutrition of the Chicken, 4:e upplagan. University Books, Guelph, ON, Kanada.

Lin H., Mertens K., Kemps B., Govaerts T., De Ketelaere B., De Baerdemaeker J., Decuypere E., Buyse J., 2004. Ny metod för att testa effekten av värmestress på äggskalskvalitet: mekanisk och materialegenskaper hos äggskal och membran. Braz. Poult. Sci. 45, 476-482.

Mabe, IC, Rapp, M., Bain, M., Nys, Y., 2003. Komplettering av en majssojamjölsdiet med mangan, koppar och zink från organiska eller oorganiska källor förbättrar äggskalskvaliteten hos åldrade värphöns. Poult. Sci. 82, 1903–1913.

Mahan, D., Zawadzki, J., Guerrero, R., 2002. Mineralmetabolism och galtfertilitet: observationer från Latinamerika till Europa. I: Lyons, TP, Jacques, KA (red.), Nutritional Biotechnology in the Feed Industries:

Föregående av Altechs 18:e årliga symposium. Nottingham University Press, Nottingham, Storbritannien. pp. 411–418.

Moreira J., Santos CD, Abreu CMP, Bertechini AG, Oliveira DF, Cardoso MG, 2001. Effekt av selenkälla och nivåer på glutationperoxidas enzymaktivitet och broilerprestanda. Vetenskap Agrotec. 25, 664-666.

Osman, AMR, Wahed, HMA, Ragab, MS, 2010. Effekt av att komplettera värphönsfoder med organiskt selen på äggproduktion, äggkvalitet, fertilitet och kläckbarhet. Egypten. Poult. Sci. J. 30, 893-915.

Peebles, ED, McDaniel, CD, 2004. En praktisk manual för att förstå skalstrukturen hos kläckningsägg från broiler och mätningar av deras kvalitet. Mississippi Agric. Skog. Exp. Stn. Tjur. 1139.

Renema, RA, 2004. Reproduktiva svar på selplex® organiskt selen hos manliga och kvinnliga broileruppfödare: inverkan på produktionsegenskaper och kläckbarhet. I: Lyons, TP, Jacques, KA (red.), Nutritional Biotechnology in the Feed and Food Industries, Proceedings of Alltechs 20th Annual Symposium. Nottingham University Press, Storbritannien. pp. 81–91.

Richards, MP, 1997. Spårmineralmetabolism i fågelembryot. Poult. Sci. 76, 152–164.

Robinson, DS, King, NR, 1963. Kolsyraanhydras och bildning av hönsäggskal. Nature 199, 497-498.

Rodriguez-Navarro, A., Kalin, O., Nys, Y., Garcia-Ruiz, JM, 2002. Mikrostrukturens inverkan på skalstyrkan hos ägg som läggs av höns i olika åldrar. Br. Poult. Sci. 43, 395-403.

Rosa, AP, Paganini, FJ, Vieira, NS, Paloschi, JL, 1995. Inverkan av artificiell inseminationsintervall och inseminationshanteringsstress på produktionen och fertiliteten hos fjäderfähonor. Vetenskap Landsbygden 25, 443–447.

Rutz F, Pan EA, Xavier GB, Anciuti MA, 2003. I: Lynons TP, Jacques KA (Eds.), Nutritional Biotechnology in The Feed and Food Industries. Proceedings of Alltech'S 19^th Årligt symposium. Nottingham University Press, Nottingham, Storbritannien. pp. 147–161.

Saldanha, ESPB, Garcia, EA, Pizzolante, CC, Faittarone, ABG, Sechinato, A., Molino, AB, Laganá, C., 2009. Effekt av organiskt mineraltillskott på äggkvaliteten i halvtunga lager i deras andra cykel av lekmanna. Braz. J. Poultry Sci. 11, 215–222.

SAS Institute, 2016. SAS Användarguide: Statistik. Version 9.2 Review Edition. SAS Institute Inc, Cary, NC.

Shan, TI, Dai, PI, Zhu, P., Chen, L., Wu, W., Li, Y., Li, C., 2017. Effekt av en organisk spårmineralpremix på spermakvaliteten, testikelmorfologin och genuttryck relaterat till testosteronsyntes hos manliga broileruppfödare. Braz. J. Poultry Sci. 19, 481-488.

Stefanello, C., Santos, TC, Murakami, AE, Martins, EN, Carneiro, TC, 2014. Produktiv prestanda, äggskalskvalitet och äggskalsultrastruktur hos värphöns utfodrade dieter kompletterade med organiska spårmineraler. Poult. Sci. 93, 104–113.

Sun Q., Guo Y., Ma S., Yuan J., An S., Li J., 2012. Mineralkällor i kosten förändrade lipid- och antioxidantprofiler hos broileruppfödare och tillväxt efter kläckning av deras avkomma. Biol. Spåra Elem. Res. 145, 318-324.

Surai PF, Kostjuk IA, Wishart G., Macpherson A., Speake B., Noble RC, Ionov IA, Kutz E., 1998. Effekt av vitamin E och selen från tuppkost på glutationperoxidasaktivitet och lipidperoxidationskänslighet i spermier, tester och lever. Biol. Spåra Elem. Res. 64, 119-132.

Swiatkiewicz, S., Koreleski, J., 2008. Effekten av zink- och mangankälla i kosten för värphöns på äggskal och benkvalitet. Veterinär. Med. 53, 555–563. Swiątkiewicz, S., Arczewska-Włosek, A., Jozefiak, D., 2014. Effekten av organiska mineraler i fjäderfänäring: översyn och implikationer av nyare studier. Worlds Poult. Sci. J. 70, 475-486.

Swinkels, JWGM, Kornegay, ET, Verstegen, MWA, 1994. Biologi av zink och biologiska värde av zinkkomplex och kelater i kosten. Uppföda Res. Varv. 7, 129-149. Vieira, SL, 2008. Kelaterade mineraler för fjäderfä. Braz. J. Poultry Sci 10 (2), 73–79.

Yannakopoulos, AL, Tservenigousi, AS, 1986. Kvalitetsegenskaper hos vaktelägg. Br. Poult. Sci. 27, 171-176.

Yenice, E., Mizrak, C., Gültekin, M., Atik, Z., Tunca, M., 2015. Effekter av kosttillskott av organiskt eller oorganiskt mangan, zink, koppar och krom på prestanda, äggkvalitet och kläckningsegenskaper av värphöns. Ankara Üniv Vet Fak Derg 62, 63–68.