Επίδραση της συμπλήρωσης με οργανικά και ανόργανα μέταλλα στην απόδοση, την ποιότητα των αυγών και του σπέρματος και τα χαρακτηριστικά εκκόλαψης των ωοπαραγωγών ορνίθων

Λίστες περιεχομένου που είναι διαθέσιμο στο ScienceDirect Επιστήμη της Αναπαραγωγής των Ζώων Ιστοσελίδα επιστημονικής δημοσίευσης: www.elsevier.com/locate/anireprosci

1. Εισαγωγή

Η αποτελεσματικότητα της χρήσης ιχνοστοιχείων είναι ένα σημαντικό θέμα στη σύγχρονη διατροφή των πουλερικών, επειδή τα ιχνοστοιχεία είναι απαραίτητα για την κανονική ανάπτυξη και για πολλές μεταβολικές διεργασίες σε ζωντανούς οργανισμούς, καθώς είναι καταλύτες ή συστατικά ενζυμικών συστημάτων στα περισσότερα κύτταρα του σώματος (Swigtkiewicz et al. .., 2014), συμπεριλαμβανομένου του σχηματισμού οστών και κελύφους αυγού, δομή αυγού και ανάπτυξη εμβρύων πτηνών (Richards, 1997) και ποιότητα σπέρματος (Barber et al., 2005).

Οι περισσότερες πηγές μετάλλων που χρησιμοποιούνται σε δίαιτες για όρνιθες αναπαραγωγής προέρχονται από ανόργανες ενώσεις όπως οξείδια, θειικά άλατα, ανθρακικά και φωσφορικά άλατα. Οι οργανικές πηγές μικροορυκτών είναι μια εναλλακτική στις ανόργανες πηγές. Τα οργανικά ιχνοστοιχεία δεν διασπώνται όταν βρίσκονται σε ένα μέσο με όξινο γαστρικό pH, παραμένοντας ουδέτερα από άποψη ηλεκτρονίων και προστατευμένα από χημικές αντιδράσεις με άλλα μόρια στον εντερικό αυλό. Κατά συνέπεια, υπάρχει βελτιστοποίηση της απορρόφησης και μεγαλύτερη βιοδιαθεσιμότητα σε σύγκριση με τις ανόργανες πηγές (Swiątkiewicz et al., 2014). Τα χηλικά ή σύνθετα ορυκτά έχουν μη μεταλλικούς συνδέτες και είναι οργανικά (Vieira, 2008). Οι οργανικές ενώσεις περιέχουν ένα κεντρικό άτομο μετάλλου (δέκτης ηλεκτρονίων) και περιέχουν επίσης συνδέτες (πρωτεΐνες, αμινοξέα, υδατάνθρακες ή λιπίδια) με τουλάχιστον ένα άτομο (Ο, Ν ή S) με ένα μόνο ζεύγος ηλεκτρονίων (Swinkels et al. , 1994).

Τα οργανικά μέταλλα που παρέχονται πιο συχνά περιλαμβάνουν ψευδάργυρο, μαγγάνιο, σελήνιο, χαλκό και σίδηρο. Ο ψευδάργυρος είναι ένα συστατικό του ενζύμου ανθρακική ανυδράση, το οποίο είναι απαραίτητο για την παροχή ανθρακικών ιόντων κατά το σχηματισμό του κελύφους των αυγών (Robinson and King, 1963). Μια ανεπάρκεια ψευδαργύρου στη διατροφή του πουλιού αναπαραγωγής έχει ως αποτέλεσμα χαμηλότερη ικανότητα εκκόλαψης αυγών, υψηλότερη εμβρυϊκή θνησιμότητα (Kienholz et al., 1961) και χαμηλότερη διείσδυση σπέρματος στο ωάριο (Amen and Al-Daraji, 2011). Το μαγγάνιο είναι ο μεταλλικός ενεργοποιητής των ενζύμων που εμπλέκονται στη σύνθεση βλεννοπολυσακχαριτών και γλυκοπρωτεϊνών και που συμβάλλουν στο σχηματισμό της οργανικής μήτρας του φλοιού. Ο χαλκός παίζει ουσιαστικό ρόλο ως συμπαράγοντας για το ένζυμο λυσυλοξειδάση, το οποίο είναι σημαντικό στο σχηματισμό κολλαγόνου μεταξύ των δεσμών που υπάρχουν στη μεμβράνη του κελύφους του αυγού (Leeson and Summers, 2001). Ο σίδηρος είναι συστατικό της αιμοσφαιρίνης και της μυοσφαιρίνης και εμπλέκεται στην οξείδωση, τη μείωση και τη μεταφορά ηλεκτρονίων, απαραίτητο για τις θεμελιώδεις φυσιολογικές διεργασίες ενός οργανισμού (Andrews, 2002). Το σελήνιο δρα στα αντιοξειδωτικά συστήματα, ως συστατικό των σεληνοπρωτεϊνών, και δρα άμεσα ή έμμεσα στη μείωση του οξειδωτικού στρες (Moreira et al., 2001). Το σελήνιο είναι ένα από τα πιο σημαντικά στοιχεία στις διαδικασίες αναπαραγωγής. Μια δίαιτα ανεπαρκής σε σελήνιο μπορεί να οδηγήσει σε μείωση του αριθμού των σπερματοζωαρίων, της κινητικότητας και της ικανότητας γονιμοποίησης.

Μικρομεταλλικά όπως ο ψευδάργυρος (Zn), ο χαλκός (Cu), ο σίδηρος (Fe), το μαγγάνιο (Mn) και το σελήνιο (Se) δρουν ως καταλυτικοί ή δομικοί συμπαράγοντες σε ένζυμα και πρωτεΐνες που περιέχουν μέταλλα που περιέχονται στα κύτταρα των εμβρύων και τις εξωεμβρυϊκές τους μεμβράνες. Αυτές οι ενώσεις είναι παράγοντες που συμβάλλουν στην επιβίωση του εμβρύου. Υπάρχουν ειδικές διατροφικές απαιτήσεις για κάθε απαραίτητο ιχνοστοιχείο για διαθεσιμότητα κατά τις περιόδους ανάπτυξης και ανάπτυξης, όταν απαιτούνται συγκεκριμένα ιχνοστοιχεία για την ανάπτυξη διαφοροποιημένων ιστών στα έμβρυα πριν από την εκκόλαψη (Richards, 1997). Ο

Ο στόχος αυτής της μελέτης ήταν να αξιολογήσει την επίδραση στην απόδοση, την ποιότητα των ωαρίων, τις μεταβλητές που επηρεάζονται από την επώαση και την ποιότητα του σπέρματος της συμπλήρωσης με χηλικά μεταλλικά στοιχεία αμινοξέων (χαλκός, σίδηρος, μαγγάνιο και ψευδάργυρος) και μια πρωτεΐνη μετάλλου (σελήνιο) στη δίαιτα ωοπαραγωγών ορνίθων. και κοκόρια, παρασκευασμένα με ανόργανα μέταλλα.

2. Υλικά και μέθοδοι

Η παρούσα μελέτη πραγματοποιήθηκε στο Aiculture Laboratory-LAVIC του Ομοσπονδιακού Πανεπιστημίου της Santa Maria (UFSM). Η Επιτροπή Δεοντολογίας του UFSM ενέκρινε όλες τις διαδικασίες που χρησιμοποιήθηκαν σε αυτήν τη μελέτη. Συνολικά χρησιμοποιήθηκαν 144 λευκές ωοπαραγωγικές όρνιθες Plymouth Rock και 36 κοκόρια Red Island Rhodes Island ηλικίας 36 έως 55 εβδομάδων. Οι κότες και τα κοκόρια κατανεμήθηκαν σε μεμονωμένα κλουβιά διαστάσεων 0,33 × 0,45 × 0,40 m και 0,33 × 0,60 × 0,60 m, αντίστοιχα. Οι κότες τυποποιήθηκαν κατά βάρος και παραγωγή αυγών πριν από την έναρξη του πειράματος. Τα κοκόρια τυποποιήθηκαν με βάση το σωματικό βάρος και τα φαινοτυπικά χαρακτηριστικά. Κατά τη διάρκεια της περιόδου του πειράματος, οι κότες γονιμοποιήθηκαν τεχνητά μία φορά την εβδομάδα (0,05 ml σπέρματος· Rosa et al., 1995). Το σπέρμα συλλέχθηκε από τα κοκόρια του Rhode Island Red που τρέφονταν με την ίδια δίαιτα με τις κότες. Παρέχονταν φαγητό και νερό ad libitum🇧🇷 Τα πουλιά τρέφονταν κάθε μέρα περίπου στις 08:00. Στα κοτόπουλα δόθηκε ένας ημερήσιος κύκλος φωτός 16L:8D από την ηλικία των 36 έως 55 εβδομάδων.

2.1. Θεραπείες

Το πειραματικό σχέδιο ήταν ένα εντελώς τυχαιοποιημένο σχέδιο με τρεις θεραπείες, οκτώ επαναλήψεις και έξι κοτόπουλα το καθένα. Συνολικά 12 κοκόρια ανά θεραπεία τοποθετήθηκαν σε ξεχωριστά κλουβιά και τράφηκαν με τις ίδιες πειραματικές δίαιτες, όπου ένας κόκορας αντιπροσώπευε ένα αντίγραφο. Οι πηγές των οργανικών μικροορυκτών (OMM) ήταν: Cu, Fe, Mg και Zn χηλικά με αμινοξέα. Τα μέταλλα χηλοποιήθηκαν με τροφή σόγιας, όπου η μήτρα αμινοξέων που χρησιμοποιήθηκε ήταν τροφή σόγιας η οποία είχε ένα μη ειδικό προφίλ αμινοξέων. Το Se προμηθεύτηκε από ένα αποκλειστικό προϊόν ζύμης με σελήνιο σε μορφή μεταλλοπρωτεΐνης (YesSinergy Agroindustrial Ltda.). Cu, Fe, Mg, Zn και Se σε ανόργανη μορφή προμηθεύονταν με τροφοδοσία με σεληνίτη νατρίου (Na₂Αν το₃), θειικός χαλκός (CuSO₄), θειικός σίδηρος (FeSO₄), οξείδιο του μαγγανίου (MnO) και οξείδιο ψευδαργύρου (ZnO) από βραχώδεις πηγές. Οι όρνιθες εκτροφής τρέφονταν με βασική δίαιτα με βάση τη σόγια και το καλαμπόκι σε ηλικία 35 εβδομάδων. Στις 36 εβδομάδες, τρεις πειραματικές δίαιτες ανατέθηκαν σε κοκόρια και κότες: βασική δίαιτα (BD) που περιείχε μόνο ανόργανες πηγές μετάλλων (10 mg Cu, 60 mg Fe, 70 mg Mn, 75 mg Zn και 0,3 mg Se ανά kg δίαιτας), όπως περιγράφεται στον Πίνακα 1. Το BD αποτελούνταν από 500 g οργανικών μετάλλων ανά τόνο δίαιτας (BD +500 g OMM) που επεξεργάστηκε με την προσθήκη 2,5 mg Cu, 17,5 mg Fe, 20 mg Mn, 27,5 mg Zn και 0,08 mg Se/kg δίαιτα, και υπήρχε μια BD στην οποία προστέθηκαν 800 g OMM ανά τόνο δίαιτας (BD +800 g OMM), συμπεριλαμβανομένων 4 mg Cu, 28 mg Fe, 32 mg Mn , 44 mg Zn και 0,128 mg Se ανά kg δίαιτας. Το BD, που αποτελείται από όλα τα συστατικά και τα ανόργανα μέταλλα, αναμειγνύεται σε έναν οριζόντιο αναμικτήρα και οι πειραματικές δίαιτες αναμειγνύονται σε έναν άλλο οριζόντιο αναμικτήρα, με την προσθήκη προηγουμένως καθορισμένων ποσοτήτων οργανικών μετάλλων. Για κάθε δίαιτα, τα μπλέντερ καθαρίζονταν για να αποφευχθεί η μόλυνση με συστατικά που δεν έπρεπε να περιλαμβάνονται στη δίαιτα.

2.2. Απόδοση κότας και ποιότητα αυγών

Τα αυγά συλλέχθηκαν και οι αριθμοί καταγράφονταν τέσσερις φορές την ημέρα. Η παραγωγή αυγών από κάθε κότα υπολογιζόταν εβδομαδιαία. Η ημερήσια πρόσληψη τροφής (g/κότα ανά ημέρα), η μετατροπή της τροφής (kg τροφής/ντουζίνα αυγά που παράγονται και kg τροφής/kg αυγών που παράγονται) και το σωματικό βάρος (BW) υπολογίστηκαν σε διαστήματα 28 ημερών.

Το βάρος του αυγού, το βάρος του κρόκου, το βάρος του λευκώματος, το βάρος του κελύφους του αυγού και το ειδικό βάρος προσδιορίστηκαν εβδομαδιαίως, συνολικά 20 αναλύσεις κατά την περίοδο του πειράματος. Συνολικά 24 αυγά από κάθε ομάδα θεραπείας (τρία αυγά για κάθε ένα από οκτώ επαναλήψεις) χρησιμοποιήθηκαν σε αυτές τις αναλύσεις. Το βάρος του αυγού, το βάρος του κρόκου και το βάρος του λευκώματος προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας ζυγό ακριβείας (0,001 g). Τα αυγά ταυτοποιήθηκαν ως

Τραπέζι 1

Σύνθεση βασικής δίαιτας και θρεπτικά περιεχόμενα πειραματικών δίαιτων.

Συστατικά	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM
Καλαμπόκι (g/kg)	650.22	650.22	650.22
Τροφή σόγιας (460 g/kg πρωτεΐνη) (g/kg)	241.73	241.73	241.73
Σογιέλαιο (g/kg)	1.49	1.49	1.49
Φωσφορικό όξινο ασβέστιο (180 g/kg P, 210 g/kg Ca) (g/kg)	10.66	10.66	10.66
Ασβεστόλιθος (380 g/kg Ca) (g/kg)	81.88	81.88	81.88
Αλάτι (g/kg)	4.00	4.00	4.00
Προμίγμα ανόργανων βιταμινών και μετάλλων1 (g/kg) Οργανικά ορυκτά2	10.0	10.0	10.0
Χηλικό αμινοξύ χαλκού (mg/kg)	🇧🇷	2.5	4
Χηλικό αμινοξύ μαγγανίου (mg/kg)	🇧🇷	20	32
Χηλικό αμινοξύ ψευδαργύρου (mg/kg)	🇧🇷	27.5	44
Χηλικό αμινοξύ σιδήρου (mg/kg)	🇧🇷	17.5	28
Μαγιά σεληνίου (mg/kg)	🇧🇷	0.08	0.128
Ιώδιο (mg/kg)3 Υπολογιζόμενη Διατροφική Σύνθεση (g/kg)	🇧🇷	0.6	0.96
Ακατέργαστη πρωτεΐνη	17.00	17.00	17.00
Μεταβολιζόμενη ενέργεια (kcal/kg)	2768	2768	2768
Ασβέστιο	35.0	35.0	35.0
Διαθέσιμος Φώσφορος	3.0	3.0	3.0
Ανάλυση διατροφικής σύνθεσης (g/kg)
Ακατέργαστη πρωτεΐνη	16.58	15.49	15.60
Ακαθάριστη ενέργεια (kcal/kg)	3893	3958	3884
τέφρα	14.38	13.29	15.69
Ασβέστιο	33.5	33.4	33.3
Ολικός φώσφορος (Σύνολο P)	5.1	5.1	5.1

¹Προμίγμα μετάλλων και βιταμινών: Επίπεδα ανά κιλό δίαιτας (DSM Nutritional Products Ltd.): Βιταμίνη Α 1500 IU; βιταμίνη D3 4500 IU; βιταμίνη Ε 80 IU; βιταμίνη Κ3 5 mg; βιταμίνη Β1 3,5 mg; βιταμίνη Β2 12 mg; βιταμίνη Β6 6 mg; βιταμίνη Β12 40 mcg; νιασίνη 60 mg; παντοθενικό οξύ 20 mg; βιοτίνη 0,4 mg; φολικό οξύ 3 mg; σίδηρος 60 mg; χαλκός 10 mg; ψευδάργυρος 75 mg; μαγγάνιο 70 mg; ασκορβικό οξύ 0,15 mg; σελήνιο 0,3 mg; ιώδιο 10 mg; μεθειονίνη 1,04 g; φυτάση 600 FYT/g; κοβάλτιο 1 mg; ενραμυκίνη 5 mg; λυσίνη 0,15 g; Protease 11250 Prot/kg.

• YesSinergy Brasil (Yes Minerals) 360 – Πουλιά.
• Inorganic Iodine (Yes Minerals) 360– Πουλερικά.

Τα άθικτα αυγά υποβλήθηκαν σε αξιολόγηση ειδικού βάρους χρησιμοποιώντας τη μέθοδο εμβάπτισης των αυγών σε αλατούχο διάλυμα. Επτά διαλύματα, με πυκνότητες μεταξύ 1070 και 1100 g/cm³, με βαθμιαίες διακυμάνσεις 0,05 μεταξύ των διαλυμάτων, παρασκευάστηκαν. Τα ειδικά βάρη προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας ένα πυκνόμετρο και την Αρχή του Αρχιμήδη όπως περιγράφεται από τους Peebles και McDaniel (2004). Μετά την ολοκλήρωση των αξιολογήσεων ειδικού βάρους, χρησιμοποιήθηκαν δείγματα τριών αυγών ανά πειραματική μονάδα για τον προσδιορισμό του ύψους λευκώματος.

Οι μετρήσεις σε χιλιοστά (mm) συσχετίστηκαν με το βάρος του αυγού, προσδιορίζοντας έτσι τη μονάδα Haugh: 100* log (H − 1,7 W0,37 + 7,6)

H = όπου ύψος λευκώματος (mm) και W = βάρος αυγού (g).

Η ποιότητα του κρόκου αξιολογήθηκε μετρώντας το ύψος του οφθαλμού (YH) και το πλάτος του οφθαλμού (YW) και ο δείκτης οφθαλμών (YI) υπολογίστηκε ως ο λόγος αυτών των παραμέτρων ως YI = YH/YW. Οι τρεις κρόκοι και τα τρία δείγματα λευκώματος αναμίχθηκαν χωριστά πριν από τον προσδιορισμό του ρΗ χρησιμοποιώντας έναν ψηφιακό μετρητή πάγκου.

Τα τσόφλια αυγών από την προηγούμενη ανάλυση χρησιμοποιήθηκαν για τον προσδιορισμό του πάχους και του βάρους των κελύφους. Το βάρος και το πάχος των φλοιών, ωστόσο, προσδιορίζονταν κάθε 28 ημέρες (συνολικά πέντε αναλύσεις κατά τη διάρκεια ολόκληρης της περιόδου του πειράματος). Το κέλυφος του αυγού ζυγίστηκε αφού ξηράνθηκε σε θερμοκρασία δωματίου για 72 ώρες (RodriguezNavarro et al., 2002). Κελύφη από τρία αυγά ανά πειραματική μονάδα χρησιμοποιήθηκαν για τον προσδιορισμό του πάχους του κελύφους με ένα εξωτερικό ηλεκτρονικό μικρόμετρο 0,001 mm σε τρία σημεία στην ισημερινή ζώνη κάθε αυγού (Lin et al., 2004). Η αντοχή του κελύφους του αυγού προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας υφόμετρο TA.XT2 Texture Analyzer με ανιχνευτή Cyln από ανοξείδωτο χάλυβα 5 mm (Texture Technologies Corp. and Stable Micro Systems Ltd., Hamilton, ΜΑ) σε τρία επιπλέον αυγά ανά αντίγραφο.

2.3. Απόδοση κόκορα και ποιότητα σπέρματος

Η ημερήσια πρόσληψη τροφής (g/αρσενικό ανά ημέρα) και το σωματικό βάρος (BW) υπολογίστηκαν κάθε 28 ημέρες. Το σπέρμα συλλέχθηκε ανά δεκαπενθήμερο χρησιμοποιώντας τη μέθοδο ραχιαίο και κοιλιακό μασάζ, σε διαβαθμισμένους σωλήνες Falcon τοποθετημένους σε λουτρό νερού στους 37° C. Μετά τη συλλογή, ελέγχθηκαν ο όγκος της εκσπερμάτισης, η κινητικότητα του σπέρματος, το σφρίγος και το pH του σπέρματος. Η κινητικότητα του σπέρματος προσδιορίστηκε ως το ποσοστό των κινητικών σπερματοζωαρίων (με ίσιο και προοδευτικό τρόπο) και το σφρίγος της κινητικότητας του σπέρματος προσδιορίστηκε με βάση τα χαρακτηριστικά κινητικότητας (Celeghini et al., 2001). Για αυτή την ανάλυση, 5 μL σπέρματος εναποτέθηκαν σε θερμαινόμενη αντικειμενοφόρο πλάκα και παρατηρήθηκαν χρησιμοποιώντας οπτικό μικροσκόπιο, με μεγέθυνση 200x. Η τιμή του ρΗ του φρέσκου σπέρματος προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας δοκιμαστικές ταινίες (MColorpHastTM, Merck Millipore, Billerica, ΜΑ, ΗΠΑ). Για τη συγκέντρωση του σπέρματος και τη μορφολογική ανάλυση, προστέθηκαν 5 μL σπέρματος σε 5 ml διαλύματος φορμαλίνης:κιτρικού. Για τον προσδιορισμό του

συγκέντρωση σπέρματος, το σπέρμα αραιώθηκε σε αναλογία 1:1000 και ο αριθμός των σπερματοζωαρίων πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας αιμοκυτταρόμετρο (Θάλαμος Neubauer) με αποτέλεσμα εκφρασμένο σε αριθμό κυττάρων ανά mm³ του σπέρματος σύμφωνα με την τεχνική που περιγράφεται από τους Brillard και McDaniel (1985). Το αποτέλεσμα μετασχηματίστηκε στον αριθμό των κυττάρων ανά ml σπέρματος. Συνολικά 100 σπερματοζωάρια αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας εμβάπτιση λαδιού χρησιμοποιώντας μικροσκόπιο αντίθεσης φάσης (μεγέθυνση 1000x) και τα σπερματοζωάρια ταξινομήθηκαν ως με φυσιολογικές ή ανώμαλες δομές (κατηγοριοποιήθηκαν σε ανωμαλία κεφαλής, μεσαίου τεμαχίου και ουράς) και το συνολικό ποσοστό φυσιολογικών ή μη φυσιολογικών υπολογίστηκαν τα σπερματοζωάρια.

2.4. Μεταβλητές επώασης

Για την αξιολόγηση της εκκολασιμότητας, της εκκολασιμότητας των γόνιμων αυγών, της γονιμότητας, της εμβρυϊκής θνησιμότητας, των τρυπημένων αυγών, της ποιότητας και του βάρους του νεοσσού, τα αυγά επωάζονταν κάθε εβδομάδα (συνολικά 20 επωάσεις). Μόνο υγιή αυγά χωρίς ορατές ανωμαλίες χρησιμοποιήθηκαν για επώαση. Όλα τα αυγά που συλλέχθηκαν καθημερινά ταξινομήθηκαν και διαχωρίστηκαν για επώαση για κάθε πειραματική ομάδα. Αυτά τα αυγά που θεωρήθηκαν κατάλληλα για εκκόλαψη αποθηκεύτηκαν για μέγιστη περίοδο 7 ημερών σε δωμάτιο ελεγχόμενης θερμοκρασίας (18–20° C και 75%–80% RH (σχετική υγρασία)). Η επώαση πραγματοποιήθηκε σε έναν εμπορικό επωαστήρα πολλαπλών σταδίων (Casp, Amparo, SP, Βραζιλία) στους 37,5°C και 60% RH. Στις 18 ημέρες, τα αυγά μεταφέρθηκαν στον εξοπλισμό επώασης, ο οποίος βαθμονομήθηκε στους 36,5°C και 65% RH. Ο ρυθμός επώασης προσδιορίστηκε σε σχέση με τον συνολικό αριθμό των αυγών που επωάστηκαν. Η γονιμότητα αναφέρεται στο ποσοστό των εκκολαπτόμενων αυγών που ήταν γόνιμα, ενώ η ικανότητα εκκόλαψης είναι το ποσοστό των γόνιμων αυγών που εκκολάπτονται. Οι νεοσσοί αφαιρέθηκαν από τη θερμοκοιτίδα, ζυγίστηκαν και ταξινομήθηκαν σε νεοσσούς πρώτης και δεύτερης ποιότητας. Οι νεοσσοί θεωρούνταν δεύτερης ποιότητας όταν υπήρχε ομφαλός, ανωμαλίες στο ράμφος, αδυναμία ή πτώση των κάτω άκρων και υπερβολικά βρεγμένα φτερά. Για την αξιολόγηση του ρυθμού εκκόλαψης, της γονιμότητας και της εμβρυϊκής θνησιμότητας των γόνιμων αυγών, των αυγών από τα οποία

επώαση δεν συνέβη υποβλήθηκαν σε εμβρυϊκή διάγνωση. Σε αυτή την αξιολόγηση, τα ωάρια ταξινομήθηκαν, χρησιμοποιώντας μακροσκοπικές οπτικές εξετάσεις, ως στείρα ή ως εξής: Η θνησιμότητα των εμβρύων σημειώθηκε κατά τις πρώτες 48 ώρες της περιόδου επώασης (ΕΜ1). Θνησιμότητα εμβρύων που εμφανίζεται μεταξύ της 3ης και 7ης ημέρας της περιόδου επώασης (ΕΜ2), θνησιμότητα εμβρύων μεταξύ της 8ης και 14ης ημέρας της περιόδου επώασης (ΕΜ3). Η θνησιμότητα των εμβρύων σημειώθηκε κατά τη διάρκεια της 15ης και 21ης ημέρας της περιόδου επώασης (EM4). και διάτρητα αυγά – εκείνα στα οποία τα έμβρυα έχουν σπάσει το κέλυφος, αλλά από τα οποία δεν έχουν προκύψει έμβρυα τη στιγμή της αφαίρεσης των νεοσσών από τον εξοπλισμό επώασης, αλλά με τα έμβρυα ακόμα ζωντανά.

2.5. Πειραματικός σχεδιασμός και στατική ανάλυση

Ο πειραματικός σχεδιασμός ήταν ένας εντελώς τυχαιοποιημένος σχεδιασμός με τρεις θεραπείες οκτώ επαναλήψεων που πραγματοποιήθηκαν με έξι κοτόπουλα. Ταΐστηκαν με τις ίδιες δίαιτες με τις κότες, χρησιμοποιήθηκαν 12 κόκορες ανά θεραπεία, όπου ένας κόκορας αντιπροσώπευε μια επανάληψη. Κάθε κόκορας αντιπροσώπευε μια επανάληψη. Όλα τα δεδομένα υποβλήθηκαν σε ανάλυση διασποράς. Κάθε μεταβλητή αξιολογήθηκε για κανονικότητα και ετερογένεια διακύμανσης πριν από την εκτέλεση της ANOVA. Όταν υπήρχαν σημαντικές διαφορές σε Π < 0,05 Το Tukey's Test χρησιμοποιήθηκε για σύγκριση μεταξύ των θεραπειών. Οι στατιστικές διαδικασίες πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας το SAS Institute (2016).

3. Αποτελέσματα

3.1. Απόδοση κότας και ποιότητα αυγών

Τα δεδομένα για την παραγωγή αυγών περιλαμβάνονται στον Πίνακα 2. Η παραγωγή αυγών ήταν υψηλότερη στην ομάδα θεραπείας με BD +800 g OMM από ό,τι στην ομάδα ελέγχου (BD) τις εβδομάδες 43, 44, 45 και 49 (Π = 0.0275, Π = 0.0065, Π = 0,0112 και Π = 0,0285, αντίστοιχα), και κατά τις υπόλοιπες εβδομάδες υπήρξε μια τάση προς υψηλότερη παραγωγή αυγών από όρνιθες που τρέφονταν με BD 800 g OMM σε σύγκριση με το BD. Αυτή η τάση παρατηρήθηκε επίσης για το μέσο όρο της συνολικής περιόδου με όρνιθες που τρέφονται με BD + 800 g OMM (79,72%) να έχουν υψηλότερη μέση παραγωγή αυγών από τις όρνιθες που τρέφονται με BD (75,68%). Το ΣΚ και η πρόσληψη τροφής δεν επηρεάστηκαν από τη διατροφική συμπερίληψη οργανικών μικροορυκτών (Π > 0,05; δεδομένα δεν εμφανίζονται). Μετατροπή τροφοδοσίας kg/kg (BD, 2,59; BD + 500 g OMM, 2,45 και BD + 800 g OMM, 2,51) και kg/d (BD, 1,86; BD + 500 g OMM, 1,74 και BD + 800 g OMM, 1. ) δεν επηρεάστηκαν λόγω της συμπερίληψης του ΟΜΜ στις δίαιτες

(Π > 0,05; δεδομένα δεν εμφανίζονται). Βάρος αυγών (Π = 0,2863), βάρος κρόκου (Π = 0,9634), βάρος λευκώματος (Π = 0,1692), βάρος κελύφους αυγού (Π = 0,3337), ειδικό βάρος (Π = 0,3731), μονάδα Haugh (Π = 0,9581), pH κρόκου (Π = 0,6171), pH λευκώματος (Π = 0,6989), πάχος κελύφους αυγού (Π = 0,5150) και αντοχή του κελύφους (Π = 0,7979) δεν επηρεάστηκαν λόγω της συμπερίληψης του ΟΜΜ στις δίαιτες (Πίνακας 3). Ο δείκτης του κρόκου ήταν υψηλότερος στα αυγά (Π = 0,0092) από κοτόπουλα που τρέφονται με BD από ό,τι σε αυγά από κοτόπουλα που τρέφονται με BD + 800 g OMM (Πίνακας 3).

3.2. Απόδοση κόκορα και ποιότητα σπέρματος

Η συμπλήρωση με οργανικά μέταλλα δεν επηρέασε το ΣΩ και την πρόσληψη τροφής στους κόκορες (Π > 0,05; δεδομένα δεν εμφανίζονται). Τα δεδομένα για την ποιότητα του σπέρματος κόκορα περιλαμβάνονται στον Πίνακα 4. Όγκος σπέρματος (Π = 0,1054), κινητικότητα σπέρματος (Π = 0,4608), συγκέντρωση σπέρματος (Π = 0,7550), συνολικός αριθμός μη φυσιολογικών σπερματοζωαρίων (Π = 0,4650), ανωμαλία στη δομή της κεφαλής του σπέρματος (Π = 0,4650), ανωμαλία στη δομή του μεσαίου τμήματος του σπέρματος (Π = 0,6421) και ανωμαλία στη δομή της ουράς του σπέρματος (Π = 0,3174) δεν επηρεάστηκαν από την ένταξη του ΟΜΜ στη δίαιτα. Τιμές pH του σπέρματος (Π = 0,6402) κυμαινόταν από 7,0 έως 8,0, χωρίς διαφορές μεταξύ των θεραπειών. Δεν υπήρξε επίδραση της συμπλήρωσης οργανικών μετάλλων στο pH του σπέρματος. Το σφρίγος του σπέρματος ήταν υψηλότερο (Π = 0,0262) για κοκόρια που τρέφονται με BD + 800 g OMM σε σχέση με κοκόρια που τρέφονται με BD.

Πίνακας 2

Αυγοπαραγωγή ωοπαραγωγών ορνίθων που τρέφονται με σιτηρέσια που περιέχουν οργανικά ιχνοστοιχεία¹.

Ηλικία (εβδομάδες)	Θεραπείες
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	ΧΩΡΙΣ*	Τιμή P
36	75,59 ± 2,17	74,13 ± 2,17	77,38 ± 2,17	6.15	0.1370
37	75,00 ± 1,51	77,38 ± 1,51	75,85 ± 1,61	4.28	0.5418
38	82,73 ± 1,94	83,63 ± 1,94	87,50 ± 1,94	5.49	0.2072
39	82,14 ± 2,26	80,35 ± 2,26	86,60 ± 2,26	6.39	0.1565
40	80,19 ± 3,05	81,94 ± 3,05	83,03 ± 3,05	8.65	0.8043
41	78,87 ± 2,49	80,65 ± ± 2,49	85,41 ± ± 2,49	7.06	0.1838
42	80,65 ± 3,08	83,92 ± 3,08	80,65 ± 3,08	8.71	0.6910
43	76.48 σι ± 1,87	77.21 αβ ± 2,00	83.63 ένα ± 1,87	5.30	0.0275
44	77.21 σι ± 1,64	77.67 σι ± 1,53	84.69 ένα ± 1,64	4.34	0.0065
45	71.72 σι ± 2,51	75.89 αβ ± 2,51	84.01 ένα ± 2,69	7.12	0.0112
46	77,21 ± 2,94	77,38 ± 2,75	78,57 ± 2,75	7.78	0.9321
47	74,40 ± 3,35	76,48 ± 3,35	75,26 ± 3,35	9.49	0.9077
48	75,59 ± 3,04	75,59 ± 3,04	82,27 ± 3,04	8.62	0.2254
49	72.02 σι ± 2,47	77.97 αβ ± 2,47	82.14 ένα ± 2,47	6.98	0.0285
50	73,47 ± 3,07	77,38 ± 2,87	76,19 ± 2,87	8.12	0.6449
51	72,91 ± 1,71	74,70 ± 1,71	77,97 ± 1,71	4.85	0.1317
52	72,79 ± 2,58	77,67 ± 2,42	77,68 ± 2,42	6.84	0.3104
53	77,21 ± 2,64	74,10 ± 2,47	73,51 ± 2,47	7.01	0.5653
54	71,27 ± 2,75	73,80 ± 2,75	73,80 ± 2,75	7.79	0.7581
55	66,96 ± 3,15	72,91 ± 3,15	72,91 ± 3,15	8.91	0.3245
Μεσαία (36–55 εβδομάδες)	75,72 ± 1,53	77,53 ± 1,53	79,95 ± 1,53	4.33	0.1976

^{ο 🇧🇷 σι} Οι μέσοι όροι στη σειρά, χωρίς κοινό δείκτη, είναι διαφορετικοί (Π ≤ 0,05).

¹ Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν το μέσο όρο των οκτώ επαναλήψεων (δηλ. διαμερισμάτων) ανά επεξεργασία. *ΧΩΡΙΣ ΣΥΓΚΡΟΤΗΜΑ, n = 8.

Πίνακας 3

Τιμές για μεταβλητές που σχετίζονται με την ποιότητα των αυγών από κότες ηλικίας 36 έως 55 εβδομάδων¹.

Μεταβλητές	Θεραπείες
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	ΧΩΡΙΣ*	Τιμές P
Βάρος αυγών (g)	59,95 ± 0,55	59,22 ± 0,59	58,67 ± 0,55	1.57	0.2863
Βάρος κρόκου (g)	16,69 ± 0,16	16,72 ± 0,17	16,66 ± 0,16	0.47	0.9634
Βάρος λευκώματος (g)	38,03 ± 0,40	37,24 ± 0,43	36,94 ± 0,40	1.13	0.1692
Βάρος κελύφους αυγών (g)	5,22 ± 0,07	5,24 ± 0,07	5,10 ± 0,07	0.20	0.3337
Ειδικό βάρος (g/cm³)	1083,9 ± 0,52	1084,8 ± 0,56	1083,7 ± 0,52	1.49	0.3731
μονάδα haugh	95,01 ± 0,42	94,92 ± 0,45	94,84 ± 0,42	1.19	0.9581
δείκτης πολύτιμων λίθων	0.443 ένα ± 0,00	0.441 αβ ± 0,00	0.436 σι ± 0,00	0.93	0.0092
pH κρόκου	5,92 ± 0,01	5,94 ± 0,01	5,93 ± 0,01	0.03	0.6171
pH λευκώματος	8,34 ± 0,03	8,30 ± 0,03	8,31 ± 0,03	0.09	0.6989
Πάχος κελύφους αυγού (mm)	0,373 ± 3,67	0,377 ± 3,93	0,371 ± 3,67	10.40	0.5150
Αντοχή κελύφους (N)	35,79 ± 1,09	35,07 ± 1,16	34,78 ± 1,09	3.08	0.7979

^{ο 🇧🇷 σι} Οι μέσοι όροι στη σειρά, χωρίς κοινό δείκτη, είναι διαφορετικοί (Π ≤ 0,05).

1 Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέσο όρο οκτώ επαναλήψεων (δηλαδή, διαμερίσματα) ανά επεξεργασία. *ΧΩΡΙΣ ΣΥΓΚΡΟΤΗΜΑ, n = 8.

3.3. Επιδράσεις σε μεταβλητές που σχετίζονται με την ανάπτυξη του εμβρύου και των ωαρίων κατά την επώαση

Ικανότητα εκκόλαψης (Π = 0,3527), ικανότητα επώασης γόνιμων ωαρίων (Π = 0,0750), συνολική εμβρυϊκή θνησιμότητα (Π = 0,7347) σε EM1 (Π = 0,8002), EM2 (Π = 0,3548), EM3 (Π = 0,3548) και EM4 (Π = 0,5959) δεν επηρεάστηκαν από την ένταξη του ΟΜΜ στις δίαιτες. Επίσης, ο αριθμός των διάτρητων αυγών (Π = 0,4929), αριθμός νεοσσών δεύτερης ποιότητας (Π = 0,6450) και βάρος νεοσσού (Π = 0,2866) δεν επηρεάστηκαν από την ένταξη του ΟΜΜ στις δίαιτες. Η γονιμότητα ήταν υψηλότερη (Π = 0,0130) μεταξύ των κοτόπουλων στις ομάδες που τράφηκαν με BD + 500 g OMM και BD + 800 g OMM από ό,τι μεταξύ των κοτόπουλων που τράφηκαν με BD. (Πίνακας 5).

4. Συζήτηση

4.1. Μεταβλητές που σχετίζονται με την ποιότητα των ορνίθων και των αυγών

Διαφορετικά συμπληρώματα μικροορυκτών δεν επηρέασαν τις τιμές των μεταβλητών που σχετίζονται με την απόδοση, εκτός από την παραγωγή αυγών. Τα ευρήματα ότι η παραγωγή αυγών ήταν υψηλότερη όταν ταΐζονταν BD +800 g OMM από το BD κατά τη διάρκεια των εβδομάδων 43, 44, 45 και 49 της ηλικίας και ότι υπήρχε μια τάση προς υψηλότερη παραγωγή αυγών κατά τις άλλες εβδομάδες όταν η δίαιτα συμπληρώθηκε με OMM είναι ασυνεπή με τα αποτελέσματα για την παραγωγή αυγών από προηγούμενη μελέτη (Carvalho et al., 2015). Σε αυτήν την προηγούμενη μελέτη, δεν υπήρχε

Πίνακας 4

Ποιότητα σπέρματος κόκορα κατά την περίοδο πειράματος (ηλικίας 36–55 εβδομάδων)¹.

Μεταβλητές	Θεραπείες
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	ΧΩΡΙΣ*	Τιμές P
Όγκος (mL)	1,21 ± 0,08	0,96 ± 0,08	0,98 ± 0,08	0.30	0.1054
Κινητικότητα (%)	89,30 ± 1,09	89,13 ± 1,09	90,90 ± 1,09	3.79	0.4608
Δύναμη2	3.91 σι ± 0,08	4.16 αβ ± 0,08	4.21 ένα ± 0,08	0.27	0.0262
pH	7,98 ± 0,02	7,98 ± 0,02	7,95 ± 0,02	0.07	0.6402
Συγκέντρωση3	3,89 ± 0,19	3,74 ± 0,19	3,69 ± 0,19	0.67	0.7550
TAS (%)	4,97 ± 0,51	4,24 ± 0,51	5,08 ± 0,51	1.79	0.4650
AH (%)	2,21 ± 0,24	1,98 ± 0,24	2,38 ± 0,24	0.84	0.5212
AIP (%)	2,35 ± 0,25	2,08 ± 0,25	2,41 ± 0,25	0.89	0.6421
AT (%)	0,31 ± 0,05	0,30 ± 0,05	0,21 ± 0,05	0.18	0.3174

^{ο 🇧🇷 σι} Οι μέσοι όροι στη σειρά, χωρίς κοινό δείκτη, είναι διαφορετικοί (Π ≤ 0,05). ¹ Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν τον μέσο όρο των 12 επαναλήψεων (δηλ. διαμερισμάτων) ανά επεξεργασία. *ΧΩΡΙΣ ΣΥΓΚΡΟΤΗΜΑ, n = 12. ²Σθένος σπέρματος (βαθμολογίες 1–5).

³ Συγκέντρωση σπέρματος (αριθμός κυττάρων x 10⁹ mL σπέρματος).

TAS = Ολική ανωμαλία σπέρματος, AH = ανωμαλία κεφαλής, AIP = ανωμαλία στο μεσαίο κομμάτι, AT = ανωμαλία ουράς.

Πίνακας 5

Οι αναπαραγωγικές αποκρίσεις (%) αξιολογήθηκαν κατά την περίοδο του πειράματος με ωοπαραγωγικές όρνιθες ηλικίας 36-55 εβδομάδων¹.

Μεταβλητές	Θεραπείες
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	ΧΩΡΙΣ*	Τιμές P
ικανότητα επώασης	84,47 ± 1,63	85,15 ± 1,63	87,72 ± 1,63	4.63	0.3527
Ικανότητα εκκόλαψης γόνιμων αυγών	92,64 ± 0,92	89,94 ± 0,92	92,73 ± 0,92	2.61	0.0750
Γονιμότητα	90.98 σι ± 1,05	95.08 ένα ± 1,05	95.54 ένα ± 1,13	2.99	0.0130
Ολική εμβρυϊκή θνησιμότητα	5,62 ± 0,81	6,53 ± 0,81	6,02 ± 0,81	2.30	0.7347
EM12	1,54 ± 0,34	1,56 ± 0,34	1,83 ± 0,34	0.98	0.8002
EM23	1,06 ± 0,26	1,39 ± 0,26	0,84 ± 0,26	0.75	0.3548
EM34	1,12 ± 0,22	1,24 ± 0,22	0,84 ± 0,22	0.65	0.4723
EM45	1,89 ± 0,42	2,33 ± 0,42	2,49 ± 0,42	1,21	0.5959
διάτρητο	1,27 ± 0,33	1,63 ± 0,33	1,06 ± 0,33	0.95	0.4929
νεοσσοί δεύτερης ποιότητας	1,60 ± 0,35	1,27 ± 0,35	1,74 ± 0,35	1.01	0.6450
Βάρος νεοσσών (g)	41,46 ± 0,35	41,55 ± 0,35	40,79 ± 0,35	1.00	0.2866

^{ο 🇧🇷 σι} Οι μέσοι όροι στη σειρά, χωρίς κοινό δείκτη, είναι διαφορετικοί (Π ≤ 0,05).

¹ Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν το μέσο όρο των οκτώ επαναλήψεων (δηλ. διαμερισμάτων) ανά επεξεργασία. *ΧΩΡΙΣ Αδρανή. n = 8, Επωάσεις ανά εβδομάδα, σύνολο: 20.

²EM1 = εμβρυϊκή θνησιμότητα στις πρώτες 48 ώρες της επώασης.

³EM2 = εμβρυϊκή θνησιμότητα σημειώθηκε μεταξύ d 3 και 7 της επώασης.

⁴ΕΜ3 = εμβρυϊκή θνησιμότητα σημειώθηκε μεταξύ 8 και 14 ημερών της επώασης.

⁵ΕΜ4 = εμβρυϊκή θνησιμότητα σημειώθηκε μεταξύ 15 και 21 ημέρας επώασης.

επίδραση στην παραγωγή αυγών ωοπαραγωγών ορνίθων όταν ένα μείγμα οργανικών ιχνοστοιχείων (Cu, Fe και Mn χηλικά με αμινοξέα και μερικώς υδρολυμένες πρωτεΐνες) συμπεριλήφθηκε στη βασική δίαιτα αντικαθιστώντας τα 100%, 90%, 80% ή 70% των ορυκτών.

Οι Kirchgessner και Grassmann (1970) ανέφεραν ότι τα οργανικά ορυκτά σχηματίζουν σταθερά σύμπλοκα, τα οποία μειώνουν την πιθανότητα σχηματισμού κατακρημνισμένων αλάτων με ενώσεις όπως το φυτικό οξύ ή αδιάλυτες ίνες.

Τα οργανικά μικροορυκτά, επομένως, είναι πιο διαθέσιμα για βιολογικές λειτουργίες λόγω μεγαλύτερης διαλυτότητας και απορρόφησης όταν βρίσκονται σε οργανική μορφή, με διευκόλυνση αυτών των διεργασιών από τα οργανικά συστατικά δέσμευσης. Στην παρούσα μελέτη, υπήρξε αύξηση στην παραγωγή αυγών με τη χρήση οργανικών μικροορυκτών, τα οποία μπορεί να σχετίζονται με αυτά τα θετικά χαρακτηριστικά του OMM από την άποψη της διαλυτότητας και της απορρόφησης. Οι άλλες μεταβλητές που σχετίζονται με την απόδοση δεν επηρεάστηκαν, κάτι που θα μπορούσε να αναμενόταν επειδή η βασική δίαιτα που χρησιμοποιήθηκε για όλες τις θεραπείες ήταν ήδη ισορροπημένη για να καλύψει τις απαιτήσεις των όρνιθες για αυτά τα μικροθρεπτικά συστατικά.

Η ποιότητα των αυγών δεν επηρεάστηκε από τα συμπληρώματα διατροφής με OMM. Αυτό το εύρημα είναι συνεπές με τα αποτελέσματα μιας προηγούμενης μελέτης (Stefanello et al., 2014) στην οποία πραγματοποιήθηκε αξιολόγηση της ποιότητας των ωαρίων. Στην προηγούμενη μελέτη, οι ωοτόκες όρνιθες ηλικίας μεταξύ 47 και 62 εβδομάδων τρέφονταν με δίαιτες συμπληρωμένες με οργανική πηγή (πρωτεΐνες) ιχνοστοιχείων (Mn, Zn και Cu) και δεν υπήρχε καμία επίδραση στο ειδικό βάρος του αυγού. Επίσης, οι Saldanha et al. (2009) αξιολόγησαν την επίδραση του

συμπλήρωση με οργανικά μέταλλα (Zn, Fe, Mn, Cu, I και Se). Σε αυτήν την προηγούμενη μελέτη, δεν υπήρξε καμία επίδραση αυτών των συμπληρωμάτων στην ποιότητα των αυγών των ωοπαραγωγών ορνίθων (ηλικίας 83 εβδομάδων) και δεν υπήρξε επίδραση των θεραπειών στα ποσοστά κρόκου και λευκώματος. Σε εκείνη την προηγούμενη μελέτη, ωστόσο, υπήρχε επίδραση στο ειδικό βάρος των αυγών και στο ποσοστό των κελύφους όταν συμπεριλήφθηκε 80% οργανικών μικροορυκτών για να αντικαταστήσει τα ανόργανα ανόργανα άλατα. Garcia et al. (2010) ανέφερε ότι ένα αλκαλικό pH επηρεάζει αρνητικά τη μεμβράνη της βιταλλίνης. Επίσης, αλκαλικά ιόντα της αλβουμίνης, όπως Na, K και Mg, μπορούν να μεταφερθούν από το λεύκωμα στον κρόκο. Η μετανάστευση των αλκαλικών ιόντων μπορεί να οδηγήσει σε αναδιάταξη με το

ιόντα υδρογόνου που υπάρχουν στον κρόκο, τα οποία θα μπορούσαν να οδηγήσουν σε αύξηση του pH του κρόκου. Αυτή η αλλαγή του pH θα μπορούσε να οδηγήσει σε μετουσίωση της πρωτεΐνης στον κρόκο, αυξάνοντας το ιξώδες του κρόκου. Στην παρούσα μελέτη, η συμπερίληψη του ΟΜΜ στις δίαιτες των ορνίθων δεν επηρέασε το pH του κρόκου και του λευκώματος, επομένως δεν θα έπρεπε να υπάρχουν προβλήματα αυτού του τύπου εάν υπήρχε η συμπερίληψη του ΟΜΜ στις δίαιτες των ωοπαραγωγών ορνίθων. Πολύ λίγη έρευνα έχει διεξαχθεί με πτηνά αναπαραγωγής που χρησιμοποιούνται για την παραγωγή ωοπαραγωγών ορνίθων, γεγονός που καθιστά δύσκολη τη σύγκριση των αποτελεσμάτων μεταξύ των μελετών.

Οι πηγές οργανικών ορυκτών που χρησιμοποιούνται μεμονωμένα ή μαζί δεν επηρέασαν τις τιμές για τις μονάδες Haugh (Saldanha et al., 2009; Yenice et al., 2015) ή τον δείκτη πολύτιμων λίθων (Saldanha et al., 2009). Στην παρούσα μελέτη, οι τιμές για τη μονάδα Haugh δεν επηρεάστηκαν από την προσθήκη οργανικών μετάλλων στη διατροφή, αλλά ο δείκτης του κρόκου ήταν υψηλότερος μεταξύ των πτηνών που τρέφονταν με BD από ό, τι BD +800 g OMM. Καθώς τα αυγά επιδεινώνονται, ο δείκτης του κρόκου γίνεται χαμηλότερος επειδή η δομή των ινών της μεμβράνης της βιτελλίνης χαλαρώνει και η αντοχή της μεμβράνης μειώνεται (Fromm, 1967). Στην παρούσα μελέτη, οι τιμές του δείκτη κρόκου αυγού στις όρνιθες που τρέφονται με BD (μόνο με ανόργανα μέταλλα) ήταν μεγαλύτερες από τις τιμές του δείκτη κρόκου μεταξύ όρνιθες που τρέφονται με BD +800 g OMM. δηλαδή οι οφθαλμοί έδειξαν μεγαλύτερη δομή ινών μεμβράνης. Ωστόσο, οι τιμές για τους δείκτες του κρόκου για όλες τις ομάδες θεραπείας παρέμειναν εντός αυτού που θεωρείται κατάλληλο για τα αυγά από ωοπαραγωγικές όρνιθες, που θα ήταν μεταξύ 0,3 και 0,5 (Γιαννακόπουλος και Τσερβενιγούση, 1986).

Στην παρούσα μελέτη δεν υπήρξε διαφορά στο πάχος και την αντοχή των κελύφους των αυγών λόγω των επεξεργασιών που επιβλήθηκαν. Αυτά τα ευρήματα της παρούσας μελέτης είναι συνεπή με εκείνα των Mabe et al. (2003), όπου πραγματοποιήθηκαν αξιολογήσεις συμπληρωμάτων διατροφής με Zn, Cu και Mn μεταξύ ωοπαραγωγών ορνίθων και δεν υπήρξε καμία επίδραση στην ποιότητα του κελύφους των αυγών: ποσοστό κελύφους ή δείκτης κελύφους. Σε εκείνη την προηγούμενη μελέτη, υπήρχε μεγαλύτερη αντοχή στο σπάσιμο των αυγών και στην ανθεκτικότητα στο κάταγμα, κάτι που δεν συνάδει με τα ευρήματα της παρούσας μελέτης. Οι Swiatkiewicz και Koreleski (2008) αξιολόγησαν την προσθήκη Zn και Mn από οργανικές και ανόργανες πηγές σε ωοτόκες όρνιθες ηλικίας μεταξύ 35 και 70 εβδομάδων και ανέφεραν ότι δεν υπήρξε καμία αλλαγή στο ποσοστό και το πάχος των κελύφους των αυγών.

Οι παρατηρούμενες επιδράσεις στις μηχανικές ιδιότητες του κελύφους των αυγών υποδεικνύουν ότι τα μικροστοιχεία μπορούν να αλληλεπιδράσουν άμεσα κατά τις διαδικασίες σχηματισμού ανθρακικού ασβεστίου επηρεάζοντας την υφή του κελύφους. Η παρουσία μικροστοιχείων μεταβάλλει την αρχική φάση του σχηματισμού του κελύφους (Mabe et al., 2003). Ο Bain (1990) ερεύνησε τη σχέση μεταξύ της ανθεκτικότητας σε θραύση και της υπερδομικής οργάνωσης του κελύφους και πρότεινε ότι η συμπλήρωση με μικροστοιχεία προάγει την πρώιμη τήξη κατά τα αρχικά στάδια σχηματισμού του κελύφους και επομένως βελτιώνει τη μηχανική αντοχή του αυγού ανεξάρτητα από το πάχος του. Αυτό το αποτέλεσμα μπορεί να εξηγήσει την απουσία διαφορών ως προς το βάρος και το πάχος των φλοιών που παρατηρήθηκαν στην παρούσα μελέτη.

4.2. Επιδράσεις στα κοκόρια και στην ποιότητα του σπέρματος

Ο όγκος του σπέρματος σε κοκόρια δεν ήταν διαφορετικός μεταξύ των ομάδων θεραπείας. Οι Shan et al. (2017), ωστόσο, αξιολόγησε την επίδραση ενός προμίγματος ανόργανων και οργανικών μικροορυκτών (Zn, Mn, Cu, Fe και Se) στην ποιότητα του σπέρματος των αρσενικών κοτόπουλων κρεατοπαραγωγής για εκτροφή στις 31 έως 35 εβδομάδες και κατέληξε στο συμπέρασμα ότι υπήρξε αύξηση τιμές για μεταβλητές που σχετίζονται με το σπέρμα, όπως ο όγκος και η πυκνότητα, μεταξύ κοκόριων που τρέφονται με οργανικά μέταλλα. Οργανικά ορυκτά (Cu, Zn, Mn και Se) παρέχονται από τους Mahan et al. (2002) και προστέθηκαν στις δίαιτες για την αξιολόγηση της γονιμότητας του κάπρου και τα αποτελέσματα έδειξαν ότι ο αριθμός των δόσεων σπέρματος που θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν για τεχνητή γονιμοποίηση με εκσπερμάτιση αυξήθηκε από 10,9 σε 23,4. Barber et al. (2005) πρότεινε, με βάση τα ερευνητικά αποτελέσματα με κοκόρια αναπαραγωγής, ότι τα μικροορυκτά (Se, Mn και Zn) ασκούν λειτουργίες στους αναπαραγωγικούς ιστούς κατά τη διάρκεια της σπερματογένεσης για τη βελτίωση της ποιότητας του σπέρματος.

Σύμφωνα με τους Surai et al. (1998), Η συμπλήρωση Se επηρεάζει την αντιοξειδωτική κατάσταση του σπέρματος κόκορα. Ο Edens (2002) ανέφερε ότι όταν τα κοτόπουλα τρέφονταν με βασική δίαιτα που περιείχε 0,28 ppm ανόργανου Se, το ποσοστό του φυσιολογικού σπέρματος ήταν μόνο 57,9%, με δύο σημαντικές ανωμαλίες, τα κυρτά μεσαία κομμάτια (18,7%) και τις κεφαλές τιρμπουσόν (15,41TP). Όταν το βιολογικό Se, ωστόσο, συμπεριλήφθηκε στη διατροφή των κοτόπουλων κρεατοπαραγωγής στην ίδια ποσότητα, η ποιότητα του σπέρματος βελτιώθηκε ακόμη περισσότερο και αυτές οι ανωμαλίες μειώθηκαν σε 0,7% και 0,2% και το ποσοστό του φυσιολογικού σπέρματος αυξήθηκε σε 98,7%. Τα αποτελέσματα αυτών των μελετών δείχνουν ότι η συμπερίληψη του σεληνίου στη δίαιτα των πουλερικών έχει ως αποτέλεσμα αυξημένο αριθμό σπερματοζωαρίων και η χρήση οργανικής πηγής οδηγεί σε μείωση του ποσοστού ελαττωματικών σπερματοζωαρίων, έχοντας έτσι θετική επίδραση στη γονιμοποιητική ικανότητα των αρσενικών. Στην παρούσα μελέτη, η συγκέντρωση του σπέρματος και οι ανωμαλίες μεταξύ των σπερματοζωαρίων ήταν οι ίδιες όταν ταΐζονταν οργανικά και ανόργανα μέταλλα. Παρόλα αυτά, τα αποτελέσματα της παρούσας μελέτης είναι συνεπή με τα αποτελέσματα των προηγούμενων μελετών που περιγράφηκαν παραπάνω. Αν και δεν υπήρχε καμία επίδραση στις τιμές για αυτές τις μεταβλητές, το σφρίγος του σπέρματος ήταν μεγαλύτερο μεταξύ των αρσενικών που τρέφονταν με BD +800 g OMM από ό,τι μεταξύ αυτών που τρέφονταν με BD χωρίς να συμπεριλαμβάνεται OMM. Επιπλέον, η γονιμότητα των επωασμένων αυγών ήταν υψηλότερη όταν το OMM συμπεριλήφθηκε στις δίαιτες των ορνίθων (που συζητήθηκε στη συνέχεια σε αυτό το χειρόγραφο).

Η αύξηση στο σφρίγος των σπερματοκυττάρων μπορεί να σχετίζεται με τα αποτελέσματα που αναφέρθηκαν από το Renema (2004). Σε αυτήν την προηγούμενη μελέτη, οι όρνιθες εκτροφής που τρέφονταν με βιολογικό Se είχαν μεγαλύτερο αριθμό οπών σπέρματος στο σημείο γονιμοποίησης στην περιβιτελική μεμβράνη σε σύγκριση με όρνιθες που τρέφονταν με ανόργανο Se. Αυτή η επίδραση αποδόθηκε σε αλλαγές στο περιβάλλον των ωοθηκών, όπως η μείωση των ελεύθερων ριζών στους αδένες ξενιστές του σπέρματος, λόγω της αυξημένης δραστηριότητας της υπεροξειδάσης της γλουταθειόνης (GSH-Px).

Άλλα ιχνοστοιχεία που σχετίζονται με την ποιότητα του σπέρματος είναι το Mn, το Cu και το Zn. Το Mn και το Cu είναι ισχυροί διεγέρτες της κινητικότητας του σπέρματος (Lapointe et al., 1996). Οι Amen και Al-Daraji (2011) ανέφεραν ότι ο ψευδάργυρος είναι σημαντικός για την κυτταρική διαίρεση και την παραγωγή βιώσιμου σπέρματος και είναι το πιο σημαντικό μικροορυκτό για τις αναπαραγωγικές λειτουργίες των αρσενικών ζώων. Ο μεταβολισμός της τεστοστερόνης είναι απαραίτητος για την ανάπτυξη των όρχεων, την παραγωγή σπέρματος και την κινητικότητα του σπέρματος. Σε αυτήν την προηγούμενη μελέτη (Amen and AlDaraji, 2011), αξιολογήθηκε μια αξιολόγηση της επίδρασης των συμπληρωμάτων διατροφής με διαφορετικές συγκεντρώσεις Zn σε όρνιθες κρεατοπαραγωγής και υπήρξε μεγαλύτερη διείσδυση των αυγών από το σπέρμα σε σύγκριση με όταν δεν υπήρχε συμπλήρωμα Zn. Οι Shan et al. (2017) ανέφερε ότι υπήρξε αύξηση στην κινητικότητα των σπερματοζωαρίων και ο αριθμός των φυσιολογικών σπερματοζωαρίων μεταξύ των κοκόριων αναπαραγωγής που τρέφονταν με ένα προμίγμα οργανικών μικροορυκτών σε σύγκριση με τους κόκορες που ταΐστηκαν με πρόμιγμα ανόργανων ορυκτών σε ηλικία 31 έως 35 εβδομάδων. Στην παρούσα μελέτη, η κινητικότητα του σπέρματος και ο αριθμός των μη φυσιολογικών σπερματοζωαρίων δεν επηρεάστηκαν από τη διατροφή με οργανικά μέταλλα. Θα μπορούσε να διεξαχθεί περαιτέρω έρευνα σχετικά με την ποιότητα του σπέρματος μεταξύ των κόκορων για να διαλευκανθούν τα αποτελέσματα της χρήσης ορυκτών σε οργανική μορφή.

A. Londero, et al. 🇧🇷 Animal Reproduction Science 215 (2020) 106309 4.3. Επιδράσεις σε μεταβλητές κατά την επώαση

Η γονιμότητα ήταν υψηλότερη μεταξύ των όρνιθες εκτροφής που τρέφονταν με OMM σε σύγκριση με τις όρνιθες που τρέφονταν με BD στην παρούσα μελέτη. Αυτά τα αποτελέσματα είναι συνεπή με τα ευρήματα των Rutz et al. (2003), όπου αναφέρθηκε ότι η συμπλήρωση με οργανικά μέταλλα (Se-0,2 ppm, Zn-30 ppm και Mn-30 ppm) στη διατροφή των κοτόπουλων κοτόπουλων αύξησε τη γονιμότητα σε σύγκριση με τη διατροφή με ανόργανες μορφές (Se0,3 ppm Zn-100 ppm και Mn-100 ppm). Η αύξηση της γονιμότητας των ωαρίων μπορεί να αποδοθεί στη μεγαλύτερη χρήση ορυκτών που εμπλέκονται στη γονιμοποίηση, όπως Zn, Mn, Cu και Se. Ωστόσο, οι Yanice et al. (2015) αξιολόγησε την επίδραση της συμπλήρωσης με οργανικά και ανόργανα μείγματα Mn, Zn, Cu και Cr (χηλικά σε μεθειονίνη) και ανέφερε ότι δεν υπήρχε διαφορά μεταξύ των ομάδων όσον αφορά τα γονιμοποιημένα αυγά και τους ρυθμούς εκκόλαψης.

Sun et al. (2012) ανέφερε ότι με τη συμπλήρωση οργανικών μετάλλων στις δίαιτες, υπάρχει προστασία των ορνίθων αναπαραγωγής από την υπεροξείδωση των λιπιδίων, μεγαλύτερη κατακράτηση θρεπτικών συστατικών στα αυγά και μεγαλύτερη ανάπτυξη των επόμενων απογόνων κοτόπουλων. Στην παρούσα μελέτη, τα συμπληρώματα OMM σε δίαιτες ορνίθων δεν επηρέασαν τη θνησιμότητα των εμβρύων και την ποιότητα των εκκολαφθέντων νεοσσών. Οι νεοσσοί δεύτερης ποιότητας (ανθυγιεινοί αφαλοί, σφαγμένοι και με σωματικές ανωμαλίες) και το βάρος των νεοσσών (κοτοσότες υψηλής ποιότητας) δεν επηρεάστηκαν από τις θεραπείες.

Τα ιχνοστοιχεία Zn, Mn και Cu παίζουν σημαντικούς ρόλους στην ανάπτυξη των εμβρύων, καθώς και στην εκκολαψιμότητα των αυγών (Kidd et al., 1992), και υπάρχει θετική συσχέτιση μεταξύ της περιεκτικότητας σε Zn στα αυγά και της ικανότητας εκκόλαψης αυγών των αυγών επώασης. Ο μεταβολισμός της τεστοστερόνης πρέπει να συμβαίνει για τη φυσιολογική ανάπτυξη των όρχεων, την παραγωγή σπέρματος, την κινητικότητα και τον αριθμό των σπερματοζωαρίων, με σχετικά λιγότερα οιστρογόνα στους αναπαραγωγικούς ιστούς των αρσενικών ζώων (Amen and Al-Daraji, 2011). Η συμπλήρωση της δίαιτας ωοπαραγωγών ορνίθων με οργανικό σελήνιο βελτιώνει την εκκολαπτικότητα των γονιμοποιημένων αυγών (Hanafy et al., 2009) και το ποσοστό γονιμότητας και εκκολαψιμότητας (Osman et al., 2010). Όπως περιγράφηκε προηγουμένως σε αυτό το χειρόγραφο, υπάρχουν θετικοί ρόλοι ορυκτών στις αναπαραγωγικές διαδικασίες των ορνίθων αναπαραγωγής, κάτι που επιβεβαιώθηκε στην παρούσα μελέτη λόγω της αύξησης της γονιμότητας των αυγών, αν και δεν υπήρξε καμία επίδραση στην εκκολαψιμότητα αυτών των αυγών.

5. Συμπεράσματα

Συμπερασματικά, στην παρούσα μελέτη, η συμπλήρωση με Mn, Zn, Fe, Cu και Se μπορεί να χρησιμοποιηθεί για ωοπαραγωγικές όρνιθες χωρίς να επηρεάζονται οι κύριες μεταβλητές που σχετίζονται με την απόδοση και την ποιότητα των αυγών. Υπήρξε θετική επίδραση με την τάση αύξησης της παραγωγής αυγών μεταξύ των πτηνών που τρέφονταν με οργανικά μικροορυκτά καθ' όλη την περίοδο του πειράματος. Η γονιμότητα των ωαρίων ήταν υψηλότερη με τη σίτιση OMM. Μεταξύ των πετεινών, η σίτιση με OMM είχε ως αποτέλεσμα αυξημένο σφρίγος σπέρματος χωρίς αλλαγή των τιμών για τις άλλες μεταβλητές που σχετίζονται με το σπέρμα που αξιολογήθηκαν.

Χρηματοδότηση

Δεν υπήρχαν ειδικές επιχορηγήσεις από δημόσιους, εμπορικούς ή μη κερδοσκοπικούς φορείς χρηματοδότησης για την έρευνα που αναφέρεται σε αυτό το χειρόγραφο.

Δήλωση Σύγκρουσης Συμφερόντων

Εμείς, ερευνητές από το Ομοσπονδιακό Πανεπιστήμιο της Σάντα Μαρία, δηλώνουμε ότι δεν υπάρχει σύγκρουση συμφερόντων σε αυτή τη δημοσίευση, καθώς γνωρίζουμε τη σοβαρότητα και τη σωστή συμπεριφορά της δημοσίευσης της Επιστήμης Αναπαραγωγής Ζώων.

βιβλιογραφικές αναφορές

Amen, MHM, Al-Daraji, HJ, 2011. Επίδραση των συμπληρωμάτων διατροφής με διαφορετικά επίπεδα ψευδαργύρου στη διείσδυση των σπερματοζωαρίων και στα χαρακτηριστικά γονιμότητας του κοτόπουλου εκτροφής κρεατοπαραγωγής. Pak. J. Nutri. 10, 1083–1088.

Andrews, NC, 2002. Μεταφορείς μετάλλων και ασθένεια. Curr. γνώμη χημ. Biol. 6, 181–186.

Bain, MM, 1990. Eggshell Strength: a Mechanical/Ultrastructural Evaluation. Faculty of Veterinary Medicine, University of Glasgow 266p. Barber, SJ, Parker, HM, McDaniel, CD, 2005. Ποιότητα σπέρματος κτηνοτρόφων κρεατοπαραγωγής όπως επηρεάζεται από ιχνοστοιχεία in vitro. Poult. Sci. 84, 100–105.

Brillard, JP, McDaniel, GR, 1985. Η αξιοπιστία και η αποτελεσματικότητα των διαφόρων μεθόδων για την εκτίμηση της συγκέντρωσης των σπερματοζωαρίων. Poult. Sci. 64, 155–158.

Carvalho, LSS, Rosa, DRV, Litz, FH, Fagundes, NS, Fernandes, EA, 2015. Επίδραση της συμπερίληψης οργανικού χαλκού, μαγγανίου και ψευδαργύρου στη διατροφή των στρωμάτων στην απέκκριση μετάλλων, την παραγωγή αυγών και την ποιότητα του κελύφους των αυγών. Μπραζ. J. Poult. Sci. 087–092.

Celeghini, ECC, Albuquerque, R., Arruda, RP, Lima, CG, 2001. Αξιολόγηση των σπερματικών χαρακτηριστικών των κόκορες που επιλέχθηκαν για αναπαραγωγή με ανάπτυξη χτένας. Μπραζ. J. Vet. Res. Ζώο Sci. 38, 177–183.

Edens, FW, 2002. Στο: Lyons, TP, Jacques, KA (Eds.), Practical Applications for Selenomethionine: Broiler Breeder Reproduction. Στο: Nutritional Biotechnology in the Feed and Food Industries. Πρακτικά του 18ου Ετήσιου Συμποσίου της Alltech. Nottingham University Press, Nottingham, UK, pp. 29–42.

Fromm, D., 1967. Μερικές φυσικές και χημικές αλλαγές στη μεμβράνη βιταλλίνης του αυγού της κότας κατά την αποθήκευση. J. Food Sci. 32, 52–56.

Garcia, ERM, Olandi, CCO, Oliveira, CAL, Cruz, FK, 2010. Ποιότητα αυγών ωοτόκων ορνίθων που αποθηκεύονται σε διαφορετικές συνθήκες θερμοκρασίας και αποθήκευσης. Στροφή μηχανής. Σουτιέν. Health Prod. Ζώο 11, 505–518.

Hanafy, MH, El-Sheikh, AMH, Abdalla, EA, 2009. Η επίδραση της συμπλήρωσης οργανικού σεληνίου στην παραγωγική και φυσιολογική απόδοση σε ένα τοπικό στέλεχος κοτόπουλου. Η επίδραση του οργανικού σεληνίου (Sel-PlexTM) στα παραγωγικά, αναπαραγωγικά και φυσιολογικά χαρακτηριστικά του τοπικού στελέχους bandarah. Αίγυπτος. Poult. Sci. J. 29, 1061–1084.

Kidd MT, Anthony NB, Johnson Z., Lee SR, 1992. Επίδραση της συμπλήρωσης μεθειονίνης ψευδαργύρου στην απόδοση των ώριμων κτηνοτρόφων κρεατοπαραγωγής. J. Appl. Poultry Res. 1, 207–211.

Kienholz EW, Turk DE, Sunde ML, Hoekstra WG, 1961. Επιδράσεις της ανεπάρκειας ψευδαργύρου στη δίαιτα των ορνίθων. J. Nutri. 75, 211–221.

Kirchgessner, M., Grassmann, E., 1970. Η δυναμική της απορρόφησης χαλκού. Στο: MILLS, CF (Επιμ.), Trace Elements Metabolism in Animals. Academic Press, Εδιμβούργο, σσ. 277–287.

Lapointe, S., Ahmad, Ι., Buhr, ΜΜ, 1996. Διαμόρφωση της κινητικότητας μετά την απόψυξη, της επιβίωσης, της πρόσληψης ασβεστίου και της γονιμότητας του σπέρματος βοοειδών από μαγνήσιο και μαγγάνιο. ι.

Dairy Sci. 12, 2163–2169.

Leeson, S., Summers, JD, 2001. Nutrition of the Chicken, 4η έκδ. University Books, Guelph, ON, Καναδάς.

Lin H., Mertens K., Kemps B., Govaerts T., De Ketelaere B., De Baerdemaeker J., Decuypere E., Buyse J., 2004. Νέα προσέγγιση δοκιμής της επίδρασης της θερμικής καταπόνησης στην ποιότητα του κελύφους των αυγών: μηχανική και ιδιότητες υλικού του κελύφους και της μεμβράνης του αυγού. Μπραζ. Poult. Sci. 45, 476–482.

Mabe, IC, Rapp, M., Bain, M., Nys, Y., 2003. Η συμπλήρωση μιας δίαιτας καλαμποκάλευρου με μαγγάνιο, χαλκό και ψευδάργυρο από οργανικές ή ανόργανες πηγές βελτιώνει την ποιότητα του κελύφους των αυγών σε ηλικιωμένες όρνιθες ωοπαραγωγής. Poult. Sci. 82, 1903–1913.

Mahan, D., Zawadzki, J., Guerrero, R., 2002. Μεταβολισμός ορυκτών και γονιμότητα κάπρου: παρατηρήσεις από τη Λατινική Αμερική στην Ευρώπη. Στο: Lyons, TP, Jacques, KA (Eds.), Nutritional Biotechnology in the Feed Industries:

Προηγούμενα του 18ου Ετήσιου Συμποσίου της Altech. Nottingham University Press, Nottingham, UK. σελ. 411–418.

Moreira J., Santos CD, Abreu CMP, Bertechini AG, Oliveira DF, Cardoso MG, 2001. Επίδραση της πηγής και των επιπέδων σεληνίου στην ενζυματική δραστηριότητα υπεροξειδάσης γλουταθειόνης και την απόδοση των κρεατοπαραγωγών. Επιστήμη Agrotec. 25, 664–666.

Osman, AMR, Wahed, HMA, Ragab, MS, 2010. Επίδραση της συμπλήρωσης δίαιτας ωοπαραγωγών ορνίθων με οργανικό σελήνιο στην παραγωγή αυγών, την ποιότητα των αυγών, τη γονιμότητα και την εκκολαψιμότητα. Αίγυπτος. Poult. Sci. J. 30, 893–915.

Peebles, ED, McDaniel, CD, 2004. Ένα πρακτικό εγχειρίδιο για την κατανόηση της δομής του κελύφους των αυγών επώασης κρεατοπαραγωγής και τις μετρήσεις της ποιότητάς τους. Mississippi Agric. Δάσος. Exp. Stn. Ταύρος. 1139.

Renema, RA, 2004. Αναπαραγωγικές αποκρίσεις στο οργανικό σελήνιο selplex® σε αρσενικά και θηλυκά κοτόπουλα κρεατοπαραγωγής: επίπτωση στα χαρακτηριστικά παραγωγής και εκκολαψιμότητα. Στο: Lyons, TP, Jacques, KA (Eds.), Nutritional Biotechnology in the Feed and Food Industries, Proceedings of Alltech'S 20th Annual Symposium. Nottingham University Press, UK. σελ. 81–91.

Richards, MP, 1997. Μεταβολισμός ιχνοστοιχείων στο έμβρυο πτηνών. Poult. Sci. 76, 152–164.

Robinson, DS, King, NR, 1963. Carbonic anhydrase and formation of the hen's egg shell. Nature 199, 497-498.

Rodriguez-Navarro, A., Kalin, O., Nys, Y., Garcia-Ruiz, JM, 2002. Επίδραση της μικροδομής στην αντοχή του κελύφους των αυγών που γεννούν κότες διαφορετικών ηλικιών. Br. Poult. Sci. 43, 395–403.

Rosa, AP, Paganini, FJ, Vieira, NS, Paloschi, JL, 1995. Επίδραση των διαστημάτων τεχνητής γονιμοποίησης και το στρες διαχείρισης της σπερματέγχυσης στην παραγωγή και τη γονιμότητα των θηλυκών πουλερικών. Επιστήμη Rural 25, 443–447.

Rutz F, Pan EA, Xavier GB, Anciuti MA, 2003. Στο: Lynons TP, Jacques KA (Eds.), Nutritional Biotechnology in The Feed and Food Industries. Πρακτικά του Alltech'S 19^ου Ετήσιο Συμπόσιο. Nottingham University Press, Nottingham, UK. σελ. 147–161.

Saldanha, ESPB, Garcia, EA, Pizzolante, CC, Faittarone, ABG, Sechinato, A., Molino, AB, Laganá, C., 2009. Επίδραση της συμπλήρωσης οργανικών ανόργανων συστατικών στην ποιότητα των αυγών ημιβαρέων στρωμάτων στον δεύτερο κύκλο τους του λαϊκού. Μπραζ. J. Poultry Sci. 11, 215–222.

SAS Institute, 2016. SAS User's Guide: Statistics. Έκδοση 9.2 Έκδοση αναθεώρησης. SAS Institute Inc, Cary, NC.

Shan, TI, Dai, PI, Zhu, P., Chen, L., Wu, W., Li, Y., Li, C., 2017. Επίδραση ενός προμίγματος οργανικών ιχνοστοιχείων στην ποιότητα του σπέρματος, τη μορφολογία των όρχεων και γονιδιακή έκφραση που σχετίζεται με τη σύνθεση τεστοστερόνης σε αρσενικούς εκτροφείς ορνίθων. Μπραζ. J. Poultry Sci. 19, 481–488.

Stefanello, C., Santos, TC, Murakami, AE, Martins, EN, Carneiro, TC, 2014. Παραγωγική απόδοση, ποιότητα κελύφους αυγού και υπερδομή του κελύφους αυγών ωοπαραγωγών ορνίθων που τρέφονται με δίαιτες συμπληρωμένες με οργανικά ιχνοστοιχεία. Poult. Sci. 93, 104–113.

Sun Q., Guo Y., Ma S., Yuan J., An S., Li J., 2012. Οι διαιτητικές πηγές μετάλλων αλλοίωσαν τα προφίλ λιπιδίων και αντιοξειδωτικών σε εκτροφείς ορνίθων και την ανάπτυξη των απογόνων τους μετά την εκκόλαψη. Biol. Ιχνοστοιχείο. Res. 145, 318–324.

Surai PF, Kostjuk IA, Wishart G., Macpherson A., Speake B., Noble RC, Ionov IA, Kutz E., 1998. Επίδραση βιταμίνης Ε και σεληνίου της δίαιτας κόκορα στη δραστηριότητα υπεροξειδάσης γλουταθειόνης και ευαισθησία υπεροξείδωσης λιπιδίων στο σπέρμα, εξετάσεις και συκώτι. Biol. Ιχνοστοιχείο. Res. 64, 119–132.

Swiatkiewicz, S., Koreleski, J., 2008. Η επίδραση της πηγής ψευδαργύρου και μαγγανίου στη διατροφή για όρνιθες ωοπαραγωγής στην ποιότητα του κελύφους των αυγών και των οστών. Κτηνίατρος. Med. 53, 555–563. Swiątkiewicz, S., Arczewska-Włosek, A., Jozefiak, D., 2014. Η αποτελεσματικότητα των οργανικών μετάλλων στη διατροφή των πουλερικών: ανασκόπηση και επιπτώσεις πρόσφατων μελετών. Worlds Poult. Sci. J. 70, 475–486.

Swinkels, JWGM, Kornegay, ET, Verstegen, MWA, 1994. Βιολογία ψευδαργύρου και βιολογική αξία συμπλοκών και χηλικών ενώσεων διαιτητικών ψευδαργύρου. Τρέφω Res. Στροφή μηχανής. 7, 129–149. Vieira, SL, 2008. Χηλικά ορυκτά για πουλερικά. Μπραζ. J. Poultry Sci 10 (2), 73–79.

Γιαννακόπουλος, Α.Λ., Τσερβηγούση, Α.Σ., 1986. Ποιοτικά χαρακτηριστικά αυγών ορτυκιού. Br. Poult. Sci. 27, 171–176.

Yenice, E., Mizrak, C., Gültekin, M., Atik, Z., Tunca, M., 2015. Επιδράσεις του διαιτητικού οργανικού ή ανόργανου συμπληρώματος μαγγανίου, ψευδαργύρου, χαλκού και χρωμίου στην απόδοση, την ποιότητα των αυγών και τα χαρακτηριστικά εκκόλαψης ωοπαραγωγών ορνίθων. Ankara Üniv Vet Fak Derg 62, 63–68.