Pengaruh suplementasi dengan mineral organik dan anorganik terhadap penampilan, kualitas telur dan sperma, serta karakteristik inkubasi ayam petelur

Daftar konten tersedia di ScienceDirect Ilmu Reproduksi Hewan Situs publikasi ilmiah: www.elsevier.com/locate/anireprosci

1. Perkenalan

Efektivitas penggunaan trace element merupakan topik penting dalam nutrisi unggas modern karena trace mineral sangat penting untuk pertumbuhan normal dan untuk banyak proses metabolisme dalam organisme hidup, karena merupakan katalis atau komponen sistem enzim di sebagian besar sel tubuh (Swigtkiewicz et al .., 2014), meliputi pembentukan tulang dan cangkang telur, struktur telur dan perkembangan embrio unggas (Richards, 1997), dan kualitas semen (Barber et al., 2005).

Sebagian besar sumber mineral yang digunakan dalam pakan untuk ayam pembibitan berasal dari senyawa anorganik seperti oksida, sulfat, karbonat, dan fosfat. Sumber mikromineral organik merupakan alternatif dari sumber anorganik. Mineral jejak organik tidak berdisosiasi ketika berada dalam media dengan pH asam lambung, tetap netral dalam hal elektron dan terlindungi dari reaksi kimia dengan molekul lain di lumen usus. Akibatnya, ada optimalisasi penyerapan dan bioavailabilitas yang lebih besar dibandingkan dengan sumber anorganik (Swiątkiewicz et al., 2014). Mineral chelated atau kompleks memiliki ligan non-logam dan bersifat organik (Vieira, 2008). Senyawa organik mengandung atom logam pusat (akseptor elektron) dan juga mengandung ligan (protein, asam amino, karbohidrat, atau lipid) dengan setidaknya satu atom (O, N, atau S) dengan pasangan elektron bebas (Swinkels et al. , 1994).

Mineral organik yang paling sering disuplai meliputi seng, mangan, selenium, tembaga, dan besi. Seng merupakan komponen enzim karbonat anhidrase, yang sangat penting untuk suplai ion karbonat selama pembentukan cangkang telur (Robinson dan King, 1963). Defisiensi seng pada pakan burung hasil pembiakan menghasilkan kapasitas penetasan telur yang lebih rendah, kematian embrio yang lebih tinggi (Kienholz et al., 1961) dan penetrasi sperma yang lebih rendah ke dalam telur (Amen dan Al-Daraji, 2011). Mangan adalah aktivator logam enzim yang terlibat dalam sintesis mucopolysaccharides dan glikoprotein dan berkontribusi pada pembentukan matriks organik kulit kayu. Tembaga berperan penting sebagai kofaktor untuk enzim lisil oksidase, yang penting dalam pembentukan kolagen antara ikatan yang ada pada membran kulit telur (Leeson dan Summers, 2001). Besi adalah komponen hemoglobin dan mioglobin dan terlibat dengan oksidasi, reduksi dan transpor elektron, sangat diperlukan untuk proses fisiologis dasar suatu organisme (Andrews, 2002). Selenium bekerja pada sistem antioksidan, menjadi komponen selenoprotein, dan bekerja secara langsung atau tidak langsung untuk mengurangi stres oksidatif (Moreira et al., 2001). Selenium adalah salah satu elemen terpenting dalam proses reproduksi. Diet yang kekurangan selenium dapat menyebabkan penurunan jumlah sperma, motilitas, dan kapasitas pembuahan.

Mikromineral seperti Seng (Zn), Tembaga (Cu), Besi (Fe), Mangan (Mn), dan Selenium (Se) berperan sebagai kofaktor katalitik atau struktural pada enzim dan protein yang mengandung logam yang terkandung dalam sel embrio dan membran ekstraembrionik mereka. Senyawa-senyawa tersebut merupakan faktor yang berperan dalam kelangsungan hidup embrio. Ada persyaratan diet khusus untuk setiap trace mineral esensial untuk ketersediaan selama periode pertumbuhan dan perkembangan, ketika mineral spesifik diperlukan untuk pengembangan jaringan yang berbeda dalam embrio sebelum penetasan terjadi (Richards, 1997). HAI

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengevaluasi pengaruh suplementasi dengan mineral asam amino khelat (tembaga, besi, mangan dan seng) dan logam protein (selenium) pada pakan ayam petelur terhadap kinerja, kualitas telur, variabel yang dipengaruhi oleh inkubasi dan kualitas sperma. dan ayam jantan, diformulasikan dengan mineral anorganik.

2. Bahan-bahan dan metode-metode

Penelitian ini dilakukan di Aviculture Laboratory-LAVIC dari Universitas Federal Santa Maria (UFSM). Komite Etika UFSM menyetujui semua prosedur yang digunakan dalam penelitian ini. Sebanyak 144 ayam petelur Plymouth Rock putih dan 36 ayam Rhodes Island Red umur 36 sampai 55 minggu digunakan. Ayam dan ayam jantan didistribusikan dalam kandang individu masing-masing berukuran 0,33 × 0,45 × 0,40 m dan 0,33 × 0,60 × 0,60 m. Ayam distandarisasi berdasarkan berat dan produksi telur sebelum memulai percobaan. Ayam jantan distandarisasi berdasarkan berat badan dan sifat fenotipik. Selama masa percobaan, ayam betina diinseminasi buatan seminggu sekali (0,05 ml semen; Rosa et al., 1995). Semen dikumpulkan dari ayam jantan Rhode Island Red yang diberi pakan yang sama dengan ayam betina. Makanan dan air disediakan ad libitum🇧🇷 Burung-burung itu diberi makan setiap hari sekitar pukul 08:00. Ayam diberi siklus cahaya harian 16L:8D dari usia 36 hingga 55 minggu.

2.1. Perawatan

Rancangan percobaan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap dengan tiga perlakuan, delapan ulangan dan masing-masing enam ekor ayam. Sebanyak 12 ayam jantan per perlakuan ditempatkan di kandang terpisah dan diberi pakan percobaan yang sama, di mana satu ayam mewakili ulangan. Sumber mineral mikro organik (OMM) adalah: Cu, Fe, Mg dan Zn yang dikelat dengan asam amino. Mineral dikhelat dengan pakan kedelai, dimana matriks asam amino yang digunakan adalah pakan kedelai yang memiliki profil asam amino non spesifik. Se dipasok dari produk ragi eksklusif dengan selenium dalam bentuk metalloprotein (YesSinergy Agroindustrial Ltda.). Cu, Fe, Mg, Zn dan Se dalam bentuk anorganik dipasok dengan memberi makan natrium selenit (Na₂Jika₃), tembaga sulfat (CuSO₄), besi sulfat (FeSO₄), mangan oksida (MnO) dan seng oksida (ZnO) dari sumber batuan. Ayam peternak diberi diet basal berdasarkan kedelai dan jagung chow pada usia 35 minggu. Pada 36 minggu, tiga diet percobaan ditugaskan untuk ayam jantan dan ayam: diet basal (BD) yang hanya mengandung sumber mineral anorganik (10 mg Cu, 60 mg Fe, 70 mg Mn, 75 mg Zn dan 0,3 mg Se per kg diet), seperti yang dijelaskan pada Tabel 1. BD terdiri dari 500 g mineral organik per ton diet (BD +500 g OMM) dielaborasi dengan penambahan 2,5 mg Cu, 17,5 mg Fe, 20 mg Mn, 27,5 mg Zn dan 0,08 mg Se/kg diet, dan ada BD yang ditambahkan 800 g OMM per ton diet (BD +800 g OMM), termasuk 4 mg Cu, 28 mg Fe , 32 mg Mn , 44 mg Zn dan 0,128 mg Se per kg ransum. BD, terdiri dari semua bahan dan mineral anorganik, dicampur dalam mixer horizontal dan diet eksperimental dicampur dalam mixer horizontal lainnya, dengan penambahan mineral organik dalam jumlah yang telah ditentukan sebelumnya. Untuk setiap diet, blender dibersihkan untuk menghindari kontaminasi dengan bahan-bahan yang tidak boleh dimasukkan ke dalam makanan.

2.2. Performa ayam dan kualitas telur

Telur dikumpulkan dan jumlahnya dicatat empat kali sehari. Produksi telur setiap ayam dihitung mingguan. Asupan pakan harian (g/ayam per hari), konversi pakan (kg pakan/lusin telur yang diproduksi dan kg pakan/kg telur yang diproduksi) dan berat badan (BB) dihitung pada interval 28 hari.

Berat telur, berat kuning telur, berat albumen, berat kulit telur dan berat jenis ditentukan setiap minggu, berjumlah 20 analisis selama periode percobaan. Sebanyak 24 telur dari masing-masing kelompok perlakuan (tiga telur untuk masing-masing delapan ulangan) digunakan dalam analisis ini. Berat telur, berat kuning telur dan berat albumen ditentukan dengan menggunakan timbangan presisi (0,001 g). Telur diidentifikasi sebagai

Tabel 1

Komposisi diet dasar dan kandungan nutrisi dari diet eksperimental.

Bahan	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM
Jagung (g/kg)	650.22	650.22	650.22
Pakan kedelai (460 g/kg protein) (g/kg)	241.73	241.73	241.73
Minyak kedelai (g/kg)	1.49	1.49	1.49
Dikalsium fosfat (180 g/kg P; 210 g/kg Ca) (g/kg)	10.66	10.66	10.66
Batu Kapur (380 g/kg Ca) (g/kg)	81.88	81.88	81.88
Garam (g/kg)	4.00	4.00	4.00
Premix vitamin dan mineral anorganik1 (g/kg) Mineral organik2	10.0	10.0	10.0
Asam Amino Tembaga Kelat (mg/kg)	🇧🇷	2.5	4
Asam Amino Mangan Chelated (mg/kg)	🇧🇷	20	32
Seng Kelat Asam Amino (mg/kg)	🇧🇷	27.5	44
Asam Amino Besi Kelat (mg/kg)	🇧🇷	17.5	28
Selenium ragi (mg/kg)	🇧🇷	0.08	0.128
Yodium (mg/kg)3 Komposisi Gizi Terhitung (g/kg)	🇧🇷	0.6	0.96
Protein mentah	17.00	17.00	17.00
Energi yang dapat dimetabolisme (kkal/kg)	2768	2768	2768
Kalsium	35.0	35.0	35.0
Fosfor yang tersedia	3.0	3.0	3.0
Analisis komposisi gizi (g/kg)
Protein mentah	16.58	15.49	15.60
Energi kotor (kkal/kg)	3893	3958	3884
abu	14.38	13.29	15.69
Kalsium	33.5	33.4	33.3
Total Fosfor (Total P)	5.1	5.1	5.1

¹Mineral dan Vitamin Premix: Tingkat per Kg Diet (DSM Nutritional Products Ltd.): Vitamin A 1500 IU; vitamin D3 4500 IU; vitamin E 80 IU; vitamin K3 5 mg; vitamin B1 3,5 mg; vitamin B2 12 mg; vitamin B6 6 mg; vitamin B12 40 mcg; niasin 60 mg; asam pantotenat 20 mg; biotin 0,4 mg; asam folat 3 mg; besi 60 mg; tembaga 10 mg; seng 75 mg; mangan 70 mg; asam askorbat 0,15 mg; selenium 0,3 mg; yodium 10 mg; metionin 1,04 g; fitase 600 FYT/g; kobalt 1 mg; enramycin 5 mg; lisin 0,15 g; Protease 11250 Prot/kg.

• YaSinergy Brasil (Ya Minerals) 360 – Burung.
• Yodium Anorganik (Ya Mineral) 360– Unggas.

Telur utuh menjadi sasaran evaluasi berat jenis menggunakan metode perendaman telur dalam larutan garam. Tujuh larutan, dengan kerapatan antara 1070 dan 1100 g/cm3³, dengan variasi bertahap 0,05 antara solusi, disiapkan. Gravitasi spesifik ditentukan dengan menggunakan densitometer dan Prinsip Archimedes seperti yang dijelaskan oleh Peebles dan McDaniel (2004). Setelah selesai penilaian berat jenis, sampel dari tiga butir telur per satuan percobaan digunakan untuk menentukan tinggi albumen.

Pengukuran dalam milimeter (mm) dikaitkan dengan berat telur, sehingga menentukan satuan Haugh: 100* log (H − 1,7 W0,37 + 7,6)

H = dimana tinggi albumin (mm) dan W = berat telur (g).

Kualitas kuning telur dinilai dengan mengukur tinggi kuncup (YH) dan lebar kuncup (YW), dan indeks kuncup (YI) dihitung sebagai rasio parameter ini sebagai YI = YH/YW. Tiga sampel kuning telur dan tiga albumen dicampur secara terpisah sebelum menentukan pH menggunakan pengukur pH benchtop digital.

Cangkang telur dari analisis sebelumnya digunakan untuk menentukan ketebalan dan berat cangkang. Berat dan ketebalan kulit, bagaimanapun, ditentukan setiap 28 hari (total lima analisis selama seluruh periode percobaan). Cangkang telur ditimbang setelah dikeringkan pada suhu kamar selama 72 jam (RodriguezNavarro et al., 2002). Cangkang dari tiga telur per unit eksperimen digunakan untuk menentukan ketebalan cangkang dengan mikrometer elektronik luar 0,001 mm pada tiga titik di zona ekuator setiap telur (Lin et al., 2004). Kekuatan kulit telur ditentukan menggunakan texturometer TA.XT2 Texture Analyzer dengan probe Cyln stainless steel 5 mm (Texture Technologies Corp. dan Stable Micro Systems Ltd., Hamilton, MA) pada tiga telur tambahan per ulangan.

2.3. Performa ayam jago dan kualitas sperma

Asupan pakan harian (g/jantan per hari) dan bobot badan (BB) dihitung setiap 28 hari. Semen dikumpulkan setiap dua minggu menggunakan metode pijat punggung dan perut, dalam tabung Falcon yang ditempatkan di bak air pada suhu 37 ° C. Setelah pengumpulan, volume ejakulasi, motilitas sperma, kekuatan dan pH sperma diperiksa. Motilitas sperma ditentukan sebagai persentase spermatozoa yang motil (lurus dan progresif), dan kekuatan motilitas sperma ditentukan berdasarkan karakteristik motilitas (Celeghini et al., 2001). Untuk analisis ini, 5 μL semen diendapkan pada slide yang dipanaskan dan diamati menggunakan mikroskop optik, dengan perbesaran 200x. nilai pH semen segar ditentukan dengan menggunakan strip tes (MColorpHastTM; Merck Millipore, Billerica, MA, USA). Untuk analisis konsentrasi dan morfologi sperma, 5 μL semen ditambahkan ke 5 ml larutan formalin:sitrat. Untuk menentukan

konsentrasi sperma, semen diencerkan dengan perbandingan 1:1000, dan dilakukan penghitungan jumlah sel sperma menggunakan hemositometer (Neubauer Chamber) dengan hasil dinyatakan dalam jumlah sel per mm³ semen menurut teknik yang dijelaskan oleh Brillard dan McDaniel (1985). Hasilnya diubah menjadi jumlah sel per ml semen. Sebanyak 100 spermatozoa dievaluasi menggunakan minyak imersi menggunakan mikroskop fase kontras (perbesaran 1000x), dan spermatozoa diklasifikasikan memiliki struktur normal atau abnormal (dikategorikan ke dalam kelainan kepala, tengah dan ekor), dan persentase total normal atau abnormal spermatozoa dihitung.

2.4. Variabel inkubasi

Untuk mengevaluasi daya tetas, daya tetas telur fertil, fertilitas, kematian embrio, telur tertusuk, kualitas dan bobot anak ayam, telur diinkubasi setiap minggu (total 20 inkubasi). Hanya telur sehat tanpa kelainan yang terlihat yang digunakan untuk inkubasi. Semua telur yang dikumpulkan setiap hari diklasifikasikan dan dipisahkan untuk inkubasi untuk setiap kelompok eksperimen. Telur-telur yang dianggap cocok untuk penetasan disimpan selama maksimal 7 hari di ruangan dengan suhu terkontrol (18–20° C dan 75%–80% RH (kelembaban relatif)). Inkubasi dilakukan dalam inkubator bertingkat komersial (Casp, Amparo, SP, Brazil) pada suhu 37,5°C dan 60% RH. Pada hari ke 18, telur dipindahkan ke peralatan inkubasi yang telah dikalibrasi pada suhu 36,5°C dan 65% RH. Tingkat inkubasi ditentukan dalam kaitannya dengan jumlah total telur yang diinkubasi. Kesuburan mengacu pada persentase telur menetas yang subur, sedangkan daya tetas adalah persentase telur subur yang menetas. Anak ayam dikeluarkan dari inkubator, ditimbang dan diklasifikasikan menjadi anak ayam kualitas satu dan dua. Anak ayam dianggap kualitas kedua bila terdapat umbilikus, kelainan paruh, kelemahan tungkai bawah atau bulu terkulai dan terlalu basah. Untuk menilai tingkat penetasan, kesuburan dan kematian embrio telur yang subur, telur dari mana

inkubasi tidak terjadi diajukan ke diagnostik embrionik. Dalam evaluasi ini, telur-telur tersebut diklasifikasikan, menggunakan pemeriksaan visual makroskopis, sebagai tidak subur atau sebagai: Kematian embrio terjadi selama 48 jam pertama masa inkubasi (EM1); Kematian embrio terjadi antara hari ke-3 dan ke-7 masa inkubasi (EM2), Kematian embrio terjadi antara hari ke-8 dan ke-14 masa inkubasi (EM3); Kematian embrio terjadi pada hari ke-15 dan ke-21 masa inkubasi (EM4); dan telur berlubang – di mana embrio telah memecahkan cangkangnya, tetapi dari mana embrio belum muncul pada saat mengeluarkan anak ayam dari peralatan inkubasi tetapi dengan embrio masih hidup.

2.5. Desain eksperimental dan analisis statis

Rancangan percobaan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap dengan tiga perlakuan dari delapan ulangan yang dilakukan dengan enam ekor ayam. Memberi makan diet yang sama dengan ayam, 12 ayam jantan digunakan per perawatan, di mana satu ayam mewakili pengulangan. Setiap ayam mewakili pengulangan. Semua data menjadi sasaran analisis varians. Setiap variabel dinilai untuk normalitas dan heterogenitas varians sebelum melakukan ANOVA. Ketika ada perbedaan yang signifikan dalam P < 0,05 Tukey's Test digunakan untuk perbandingan antar perlakuan. Prosedur statistik dilakukan dengan menggunakan SAS Institute (2016).

3. Hasil

3.1. Performa ayam dan kualitas telur

Data produksi telur disajikan pada Tabel 2. Produksi telur lebih tinggi pada kelompok perlakuan BD+800 g OMM dibandingkan kelompok kontrol (BD) pada minggu ke 43, 44, 45 dan 49 (P = 0.0275, P = 0.0065, P = 0,0112 dan P = 0,0285, masing-masing), dan selama minggu-minggu lainnya ada kecenderungan produksi telur yang lebih tinggi dari ayam yang diberi BD 800 g OMM dibandingkan dengan BD. Kecenderungan ini juga diamati untuk rata-rata periode total dengan ayam yang diberi BD + 800 g OMM (79.72%) memiliki produksi telur rata-rata yang lebih tinggi daripada ayam yang diberi BD (75.68%). BB dan asupan pakan tidak dipengaruhi oleh inklusi diet mikromineral organik (P > 0,05; data tidak ditampilkan). Konversi pakan kg/kg (BD, 2,59; BD + 500 g OMM, 2,45 dan BD + 800 g OMM, 2,51) dan kg/h (BD, 1,86; BD + 500 g OMM, 1,74 dan BD + 800 g OMM, 1,76 ) tidak terpengaruh karena dimasukkannya OMM dalam diet

(P > 0,05; data tidak ditampilkan). Berat telur (P = 0,2863), berat kuning telur (P = 0,9634), berat albumen (P = 0,1692), berat cangkang telur (P = 0,3337), berat jenis (P = 0,3731), Satuan Haugh (P = 0,9581), pH kuning telur (P = 0,6171), pH albumen (P = 0,6989), tebal cangkang telur (P = 0,5150) dan kekuatan cangkang (P = 0,7979) tidak terpengaruh karena dimasukkannya OMM dalam diet (Tabel 3). Indeks kuning telur lebih tinggi pada telur (P = 0,0092) dari ayam yang diberi BD dibandingkan telur dari ayam yang diberi BD + 800 g OMM (Tabel 3).

3.2. Performa ayam jago dan kualitas sperma

Suplementasi dengan mineral organik tidak mempengaruhi BB dan konsumsi pakan di antara ayam jantan (P > 0,05; data tidak ditampilkan). Data kualitas sperma ayam jantan disajikan pada Tabel 4. Volume semen (P = 0,1054), motilitas sperma (P = 0,4608), konsentrasi sperma (P = 0,7550), jumlah total sperma abnormal (P = 0,4650), kelainan pada struktur kepala sperma (P = 0,4650), kelainan pada struktur bagian tengah sperma (P = 0,6421), dan kelainan pada struktur ekor sperma (P = 0,3174) tidak terpengaruh oleh dimasukkannya OMM dalam diet. Nilai pH air mani (P = 0,6402) berkisar antara 7,0 sampai 8,0, tidak ada perbedaan antar perlakuan. Tidak ada efek suplementasi mineral organik pada pH semen. Kekuatan sperma lebih tinggi (P = 0,0262) untuk ayam jantan yang diberi BD + 800 g OMM dibandingkan ayam jantan yang diberi BD.

Meja 2

Produksi telur ayam petelur diberi pakan yang mengandung mikromineral organik¹.

Umur (minggu)	Perawatan
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	TANPA*	Nilai P
36	75,59 ± 2,17	74,13 ± 2,17	77,38 ± 2,17	6.15	0.1370
37	75.00 ± 1.51	77,38 ± 1,51	75,85 ± 1,61	4.28	0.5418
38	82,73 ± 1,94	83,63 ± 1,94	87,50 ± 1,94	5.49	0.2072
39	82,14 ± 2,26	80,35 ± 2,26	86,60 ± 2,26	6.39	0.1565
40	80,19 ± 3,05	81,94 ± 3,05	83,03 ± 3,05	8.65	0.8043
41	78,87 ± 2,49	80,65 ± ± 2,49	85,41 ± ± 2,49	7.06	0.1838
42	80,65 ± 3,08	83,92 ± 3,08	80,65 ± 3,08	8.71	0.6910
43	76.48 B ± 1,87	77.21 ab ± 2,00	83.63 sebuah ± 1,87	5.30	0.0275
44	77.21 B ± 1,64	77.67 B ± 1,53	84.69 sebuah ± 1,64	4.34	0.0065
45	71.72 B ± 2,51	75.89 ab ± 2,51	84.01 sebuah ± 2,69	7.12	0.0112
46	77,21 ± 2,94	77,38 ± 2,75	78,57 ± 2,75	7.78	0.9321
47	74,40 ± 3,35	76,48 ± 3,35	75,26 ± 3,35	9.49	0.9077
48	75,59 ± 3,04	75,59 ± 3,04	82,27 ± 3,04	8.62	0.2254
49	72.02 B ± 2,47	77.97 ab ± 2,47	82.14 sebuah ± 2,47	6.98	0.0285
50	73,47 ± 3,07	77,38 ± 2,87	76,19 ± 2,87	8.12	0.6449
51	72,91 ± 1,71	74,70 ± 1,71	77,97 ± 1,71	4.85	0.1317
52	72,79 ± 2,58	77,67 ± 2,42	77,68 ± 2,42	6.84	0.3104
53	77,21 ± 2,64	74,10 ± 2,47	73,51 ± 2,47	7.01	0.5653
54	71,27 ± 2,75	73,80 ± 2,75	73,80 ± 2,75	7.79	0.7581
55	66,96 ± 3,15	72,91 ± 3,15	72,91 ± 3,15	8.91	0.3245
Sedang (36–55 minggu)	75,72 ± 1,53	77,53 ± 1,53	79,95 ± 1,53	4.33	0.1976

^{NS 🇧🇷 B} Rata-rata berturut-turut, tanpa berbagi indeks umum, berbeda (P ≤ 0,05).

¹ Data mewakili rata-rata delapan ulangan (yaitu, kompartemen) per perlakuan; * TANPA Agregat, n = 8.

Tabel 3

Nilai variabel yang berhubungan dengan kualitas telur dari ayam umur 36 sampai 55 minggu¹.

Variabel	Perawatan
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	TANPA*	nilai P
Berat telur (g)	59,95 ± 0,55	59,22 ± 0,59	58,67 ± 0,55	1.57	0.2863
Berat kuning telur (g)	16,69 ± 0,16	16,72 ± 0,17	16,66 ± 0,16	0.47	0.9634
Berat albumen (g)	38,03 ± 0,40	37,24 ± 0,43	36,94 ± 0,40	1.13	0.1692
Berat kulit telur (g)	5,22 ± 0,07	5,24 ± 0,07	5,10 ± 0,07	0.20	0.3337
Gravitasi spesifik (g/cm³)	1083,9 ± 0,52	1084,8 ± 0,56	1083,7 ± 0,52	1.49	0.3731
unit haugh	95,01 ± 0,42	94,92 ± 0,45	94,84 ± 0,42	1.19	0.9581
indeks permata	0.443 sebuah ± 0,00	0.441 ab ± 0,00	0.436 B ± 0,00	0.93	0.0092
pH kuning telur	5,92 ± 0,01	5,94 ± 0,01	5,93 ± 0,01	0.03	0.6171
pH albumin	8,34 ± 0,03	8,30 ± 0,03	8,31 ± 0,03	0.09	0.6989
Ketebalan kulit telur (mm)	0,373 ± 3,67	0,377 ± 3,93	0,371 ± 3,67	10.40	0.5150
Kekuatan cangkang (N)	35,79 ± 1,09	35,07 ± 1,16	34,78 ± 1,09	3.08	0.7979

^{NS 🇧🇷 B} Rata-rata berturut-turut, tanpa berbagi indeks umum, berbeda (P ≤ 0,05).

1 Data mewakili rata-rata delapan ulangan (yaitu, kompartemen) per perlakuan; * TANPA Agregat, n = 8.

3.3. Efek pada variabel yang terkait dengan perkembangan embrionik dan telur selama inkubasi

Kapasitas penetasan (P = 0,3527), kapasitas inkubasi telur fertil (P = 0,0750), kematian embrionik total (P = 0,7347) dalam EM1 (P = 0,8002), EM2 (P = 0,3548), EM3 (P = 0,3548) dan EM4 (P = 0,5959) tidak terpengaruh oleh dimasukkannya OMM dalam diet. Juga, jumlah telur berlubang (P = 0,4929), jumlah anak ayam kualitas kedua (P = 0,6450) dan bobot anak ayam (P = 0,2866) tidak terpengaruh oleh dimasukkannya OMM dalam diet. Fertilitas lebih tinggi (P = 0,0130) antara ayam dalam kelompok yang diberi BD + 500 g OMM dan BD + 800 g OMM dibandingkan ayam yang diberi BD. (Tabel 5).

4. Diskusi

4.1. Variabel berhubungan dengan ayam dan kualitas telur

Suplemen mikromineral yang berbeda tidak memengaruhi nilai variabel yang terkait dengan kinerja, kecuali produksi telur. Temuan bahwa produksi telur lebih tinggi ketika BD +800 g OMM diberi makan daripada BD selama minggu ke 43, 44, 45 dan 49, dan ada kecenderungan produksi telur yang lebih tinggi selama minggu-minggu lain ketika diet dilengkapi dengan OMM tidak konsisten dengan hasil produksi telur dari penelitian sebelumnya (Carvalho et al., 2015). Pada penelitian sebelumnya tidak ada

Tabel 4

Kualitas sperma ayam jantan selama masa percobaan (umur 36–55 minggu)¹.

Variabel	Perawatan
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	TANPA*	nilai P
Volume (mL)	1,21 ± 0,08	0,96 ± 0,08	0,98 ± 0,08	0.30	0.1054
Motilitas (%)	89,30 ± 1,09	89,13 ± 1,09	90,90 ± 1,09	3.79	0.4608
Memaksa2	3.91 B ± 0,08	4.16 ab ± 0,08	4.21 sebuah ± 0,08	0.27	0.0262
pH	7,98 ± 0,02	7,98 ± 0,02	7,95 ± 0,02	0.07	0.6402
Konsentrasi3	3,89 ± 0,19	3,74 ± 0,19	3,69 ± 0,19	0.67	0.7550
TAS (%)	4,97 ± 0,51	4,24 ± 0,51	5,08 ± 0,51	1.79	0.4650
AH (%)	2,21 ± 0,24	1,98 ± 0,24	2,38 ± 0,24	0.84	0.5212
AIP (%)	2,35 ± 0,25	2,08 ± 0,25	2,41 ± 0,25	0.89	0.6421
DI (%)	0,31 ± 0,05	0,30 ± 0,05	0,21 ± 0,05	0.18	0.3174

^{NS 🇧🇷 B} Rata-rata berturut-turut, tanpa berbagi indeks umum, berbeda (P ≤ 0,05). ¹ Data mewakili rata-rata 12 ulangan (yaitu, kompartemen) per perlakuan; * TANPA Agregat, n = 12. ²Kekuatan Sperma (skor 1–5).

³ Konsentrasi sperma (jumlah sel x 10⁹ mL air mani).

TAS = Kelainan total sperma, AH = kelainan kepala, AIP = kelainan bagian tengah, AT = kelainan ekor.

Tabel 5

Tanggapan reproduksi (%) dievaluasi selama periode percobaan dengan ayam petelur berumur 36-55 minggu¹.

Variabel	Perawatan
	DB	BD+500gOMM	BD+800gOMM	TANPA*	nilai P
kapasitas inkubasi	84,47 ± 1,63	85,15 ± 1,63	87,72 ± 1,63	4.63	0.3527
Kemampuan menetaskan telur yang subur	92,64 ± 0,92	89,94 ± 0,92	92,73 ± 0,92	2.61	0.0750
Kesuburan	90.98 B ± 1,05	95.08 sebuah ± 1,05	95.54 sebuah ± 1,13	2.99	0.0130
Kematian embrionik total	5,62 ± 0,81	6,53 ± 0,81	6,02 ± 0,81	2.30	0.7347
EM12	1,54 ± 0,34	1,56 ± 0,34	1,83 ± 0,34	0.98	0.8002
EM23	1,06 ± 0,26	1,39 ± 0,26	0,84 ± 0,26	0.75	0.3548
EM34	1,12 ± 0,22	1,24 ± 0,22	0,84 ± 0,22	0.65	0.4723
EM45	1,89 ± 0,42	2,33 ± 0,42	2,49 ± 0,42	1,21	0.5959
berlubang	1,27 ± 0,33	1,63 ± 0,33	1,06 ± 0,33	0.95	0.4929
ayam kualitas kedua	1,60 ± 0,35	1,27 ± 0,35	1,74 ± 0,35	1.01	0.6450
Berat anak ayam (g)	41,46 ± 0,35	41,55 ± 0,35	40,79 ± 0,35	1.00	0.2866

^{NS 🇧🇷 B} Rata-rata berturut-turut, tanpa berbagi indeks umum, berbeda (P ≤ 0,05).

¹ Data mewakili rata-rata delapan ulangan (yaitu, kompartemen) per perlakuan; * TANPA Agregat. n = 8, Inkubasi per minggu, total: 20.

²EM1 = kematian embrio dalam 48 jam pertama inkubasi.

³EM2 = kematian embrio yang terjadi antara hari ke-3 dan ke-7 inkubasi.

⁴EM3 = kematian embrio terjadi antara hari ke-8 dan ke-14 inkubasi.

⁵EM4 = kematian embrio terjadi antara hari ke-15 dan ke-21 inkubasi.

efek pada produksi telur ayam petelur ketika campuran mineral organik (Cu, Fe dan Mn dikelat dengan asam amino dan protein terhidrolisis sebagian) dimasukkan dalam diet basal menggantikan 100%, 90%, 80%, atau 70% dari mineral anorganik.

Kirchgessner dan Grassmann (1970) melaporkan bahwa mineral organik membentuk kompleks yang stabil, yang mengurangi kemungkinan pembentukan garam yang diendapkan dengan senyawa seperti asam fitat atau serat tidak larut.

Oleh karena itu, mikromineral organik lebih tersedia untuk fungsi biologis karena kelarutan dan penyerapan yang lebih besar ketika dalam bentuk organik, dengan fasilitasi proses ini oleh komponen pengikat organik. Dalam penelitian ini, ada peningkatan produksi telur dengan penggunaan mikromineral organik, yang mungkin terkait dengan karakteristik positif dari OMM dari perspektif kelarutan dan penyerapan. Variabel lain yang terkait dengan penampilan tidak terpengaruh, yang dapat diduga karena pakan dasar yang digunakan untuk semua perlakuan sudah seimbang untuk memenuhi kebutuhan ayam akan mikronutrien ini.

Kualitas telur tidak terpengaruh oleh suplemen makanan dengan OMM. Temuan ini konsisten dengan hasil penelitian sebelumnya (Stefanello et al., 2014) dimana dilakukan penilaian kualitas telur. Dalam penelitian sebelumnya, ayam petelur antara usia 47 sampai 62 minggu diberi pakan yang dilengkapi dengan sumber organik (proteinat) dari trace mineral (Mn, Zn, dan Cu), dan tidak ada efek pada berat jenis telur. Juga, Saldanha et al. (2009) mengevaluasi efek dari

suplementasi dengan mineral organik (Zn, Fe, Mn, Cu, I, dan Se). Pada penelitian sebelumnya, tidak ada pengaruh suplemen tersebut terhadap kualitas telur ayam petelur (umur 83 minggu), dan tidak ada pengaruh perlakuan terhadap persentase kuning telur dan albumen. Namun, dalam penelitian sebelumnya, ada efek pada berat jenis telur dan persentase cangkang ketika 80% mikromineral organik dimasukkan untuk menggantikan mineral anorganik. Garcia et al. (2010) melaporkan bahwa pH basa negatif mempengaruhi membran vitelline. Juga, ion basa dalam albumin, seperti Na, K, dan Mg, dapat diangkut dari albumen ke kuning telur. Migrasi ion alkalin dapat menyebabkan penataan ulang dengan

ion hidrogen hadir dalam kuning telur, yang dapat menyebabkan peningkatan pH kuning telur. Perubahan pH ini dapat menyebabkan denaturasi protein dalam kuning telur, meningkatkan viskositas kuning telur. Dalam penelitian ini, dimasukkannya OMM dalam pakan ayam tidak mempengaruhi pH kuning telur dan albumen, oleh karena itu, seharusnya tidak ada masalah jenis ini jika dimasukkannya OMM dalam pakan ayam petelur. Sangat sedikit penelitian yang telah dilakukan dengan pemuliaan burung yang digunakan untuk produksi ayam petelur, sehingga sulit untuk membandingkan hasil antar penelitian.

Sumber mineral organik yang digunakan secara individu atau bersama-sama tidak mempengaruhi nilai unit Haugh (Saldanha et al., 2009; Yenice et al., 2015) atau indeks permata (Saldanha et al., 2009). Dalam penelitian ini, nilai unit Haugh tidak dipengaruhi oleh penambahan mineral organik dalam pakan, tetapi indeks kuning telur lebih tinggi pada unggas yang diberi BD daripada BD +800 g OMM. Saat telur memburuk, skor indeks kuning telur menjadi lebih rendah karena struktur serat membran vitellin mengendur dan kekuatan membran menurun (Fromm, 1967). Dalam penelitian ini, nilai indeks kuning telur pada ayam yang diberi BD (hanya mineral anorganik) lebih besar daripada nilai indeks kuning telur pada ayam yang diberi BD +800 g OMM; yaitu, tunas menunjukkan struktur serat membran yang lebih besar. Namun, nilai indeks kuning telur untuk semua kelompok perlakuan tetap dalam apa yang dianggap sesuai untuk telur dari ayam petelur, yaitu antara 0,3 dan 0,5 (Yannakopoulos dan Tservenigousi, 1986).

Pada penelitian ini tidak terdapat perbedaan ketebalan dan ketahanan kerabang telur akibat perlakuan yang diberikan. Temuan penelitian ini konsisten dengan penemuan Mabe et al. (2003), di mana evaluasi suplementasi makanan dengan Zn, Cu, dan Mn dilakukan pada ayam petelur, dan tidak ada pengaruh pada kualitas cangkang telur: persentase cangkang, atau indeks cangkang. Dalam penelitian sebelumnya, terdapat ketahanan yang lebih besar terhadap pemecahan telur dan ketahanan patah, yang tidak konsisten dengan temuan penelitian ini. Swiatkiewicz dan Koreleski (2008) mengevaluasi penambahan Zn dan Mn dari sumber organik dan anorganik pada ayam petelur antara umur 35 dan 70 minggu, dan melaporkan bahwa tidak ada perubahan persentase dan ketebalan kerabang telur.

Efek yang diamati pada sifat mekanik cangkang telur menunjukkan bahwa unsur mikro dapat berinteraksi secara langsung selama proses pembentukan kalsium karbonat dengan mempengaruhi tekstur cangkang. Kehadiran unsur mikro mengubah fase awal pembentukan cangkang (Mabe et al., 2003). Bain (1990) menyelidiki hubungan antara ketahanan fraktur dan organisasi ultrastruktur cangkang, dan menyarankan bahwa suplementasi dengan mikroelemen mendorong pencairan awal selama tahap awal pembentukan cangkang dan dengan demikian meningkatkan kekuatan mekanik telur terlepas dari ketebalannya. Efek ini dapat menjelaskan tidak adanya perbedaan berat dan ketebalan kulit yang diamati dalam penelitian ini.

4.2. Efek pada ayam jantan dan kualitas sperma

Volume sperma pada ayam jantan tidak berbeda antar kelompok perlakuan. Shan dkk. (2017), bagaimanapun, mengevaluasi pengaruh premix mikromineral anorganik dan organik (Zn, Mn, Cu, Fe dan Se) terhadap kualitas semen ayam pedaging jantan untuk pemeliharaan pada 31 sampai 35 minggu, dan menyimpulkan bahwa ada peningkatan nilai untuk variabel yang terkait dengan semen, seperti volume dan kepadatan, di antara ayam jantan yang diberi mineral organik. Mineral organik (Cu, Zn, Mn dan Se) disediakan oleh Mahan et al. (2002) dan ditambahkan ke diet untuk menilai kesuburan babi, dan hasilnya menunjukkan bahwa jumlah dosis semen yang dapat digunakan untuk inseminasi buatan dengan ejakulasi meningkat dari 10,9 menjadi 23,4. Barber et al. (2005) mengemukakan, berdasarkan hasil penelitian dengan ayam jantan, bahwa mikromineral (Se, Mn, dan Zn) berfungsi pada jaringan reproduksi selama spermatogenesis untuk meningkatkan kualitas semen.

Menurut Surai dkk. (1998), suplementasi Se mempengaruhi status antioksidan semen ayam. Edens (2002) melaporkan bahwa ketika ayam diberi pakan basal yang mengandung 0,28 ppm Se anorganik, persentase sperma normal hanya 57,9%, dengan dua kelainan penting, bagian tengah melengkung (18,7%) dan kepala pembuka botol (15,4%). Ketika Se organik, bagaimanapun, dimasukkan ke dalam diet ayam pedaging dalam jumlah yang sama, kualitas air mani semakin meningkat dan kelainan ini menurun menjadi 0,7% dan 0,2%, dan persentase sperma normal meningkat menjadi 98,7%. Hasil studi ini menunjukkan bahwa dimasukkannya selenium dalam diet unggas menghasilkan peningkatan jumlah sperma, dan menggunakan sumber organik menyebabkan penurunan persentase sperma yang rusak, sehingga memiliki efek positif pada kapasitas pembuahan jantan. Pada penelitian ini, konsentrasi sperma dan abnormalitas antar spermatozoa sama ketika diberi makan mineral organik dan anorganik. Meskipun demikian, hasil penelitian ini konsisten dengan hasil penelitian sebelumnya yang dijelaskan di atas. Meskipun tidak ada efek pada nilai-nilai untuk variabel-variabel ini, kekuatan sperma lebih besar pada pejantan yang diberi BD +800 g OMM daripada yang diberi BD tanpa dimasukkannya OMM. Selanjutnya, kesuburan telur yang diinkubasi lebih tinggi ketika OMM dimasukkan ke dalam diet ayam (dibahas selanjutnya dalam manuskrip ini).

Peningkatan kekuatan sel sperma mungkin terkait dengan hasil yang dilaporkan oleh Renema (2004). Pada penelitian sebelumnya, ayam breeder yang diberi Se organik memiliki jumlah lubang sperma yang lebih banyak pada titik pembuahan di membran perivitellin dibandingkan dengan ayam yang diberi Se anorganik. Efek ini dikaitkan dengan perubahan lingkungan oviductal, seperti pengurangan radikal bebas pada kelenjar inang sperma, karena peningkatan aktivitas glutathione peroxidase (GSH-Px).

Mineral lain yang relevan dengan kualitas sperma adalah Mn, Cu dan Zn. Mn dan Cu adalah stimulator motilitas sperma yang kuat (Lapointe et al., 1996). Amen dan Al-Daraji (2011) melaporkan bahwa seng penting untuk pembelahan sel dan produksi sperma yang layak, dan merupakan mikromineral terpenting untuk fungsi reproduksi hewan jantan. Metabolisme testosteron diperlukan untuk pertumbuhan testis, produksi sperma, dan motilitas sperma. Pada penelitian sebelumnya (Amin dan AlDaraji, 2011), telah dievaluasi efek suplementasi pakan dengan konsentrasi Zn yang berbeda pada ayam broiler, dan terdapat penetrasi telur yang lebih besar oleh sperma dibandingkan dengan tanpa suplementasi Zn. Shan dkk. (2017) melaporkan bahwa ada peningkatan motilitas sperma dan jumlah sperma normal di antara ayam jantan yang diberi premix mikromineral organik daripada di antara ayam jantan yang diberi premix mineral anorganik pada usia 31 hingga 35 minggu. Dalam penelitian ini, motilitas sperma dan jumlah spermatozoa abnormal tidak dipengaruhi oleh pemberian mineral organik. Penelitian lebih lanjut tentang kualitas sperma di antara ayam jantan dapat dilakukan untuk menjelaskan efek penggunaan mineral dalam bentuk organik.

A.Londero, dkk. 🇧🇷 Ilmu Reproduksi Hewan 215 (2020) 106309 4.3. Efek pada variabel selama inkubasi

Kesuburan lebih tinggi di antara ayam breeder yang diberi OMM dibandingkan dengan ayam yang diberi BD dalam penelitian ini. Hasil ini konsisten dengan temuan Rutz et al. (2003), dimana dilaporkan bahwa suplementasi dengan mineral organik (Se-0,2 ppm, Zn-30 ppm dan Mn-30 ppm) dalam ransum ayam broiler breeder meningkatkan fertilitas bila dibandingkan dengan pemberian pakan dengan bentuk anorganik (Se0,3 ppm). , Zn-100 ppm dan Mn-100 ppm). Peningkatan kesuburan telur dapat dikaitkan dengan penggunaan mineral yang lebih besar yang terlibat dalam pembuahan, seperti Zn, Mn, Cu dan Se. Namun Yanice et al. (2015) mengevaluasi efek suplementasi dengan campuran organik dan anorganik Mn, Zn, Cu dan Cr (khelat menjadi metionin), dan melaporkan bahwa tidak ada perbedaan antar kelompok dalam hal telur yang dibuahi dan tingkat penetasan.

Matahari dkk. (2012) melaporkan bahwa dengan suplementasi mineral organik dalam pakan, ada perlindungan ayam petelur terhadap peroksidasi lipid, retensi nutrisi yang lebih besar dalam telur, dan pertumbuhan yang lebih besar dari keturunan broiler berikutnya. Dalam penelitian ini, suplementasi OMM pada pakan ayam tidak mempengaruhi kematian embrio dan kualitas anak ayam yang ditetaskan. Anak ayam kualitas kedua (pusar tidak sehat, dipotong dan dengan kelainan fisik) dan bobot anak ayam (anak ayam kualitas tinggi) tidak terpengaruh oleh perlakuan.

Trace mineral Zn, Mn, dan Cu memainkan peran penting dalam perkembangan embrio, serta daya tetas telur (Kidd et al., 1992), dan ada hubungan positif antara kandungan Zn dalam telur dan daya tetas telur. Metabolisme testosteron harus terjadi untuk pertumbuhan normal testis, produksi sperma, motilitas, dan jumlah sperma, dengan estrogen yang relatif lebih sedikit pada jaringan reproduksi hewan jantan (Amin dan Al-Daraji, 2011). Suplementasi pakan ayam petelur dengan selenium organik meningkatkan daya tetas telur yang telah dibuahi (Hanafy et al., 2009), dan persentase fertilitas dan daya tetas (Osman et al., 2010). Seperti yang dijelaskan sebelumnya dalam manuskrip ini, ada peran positif mineral dalam proses reproduksi ayam betina, yang dikonfirmasi dalam penelitian ini karena peningkatan kesuburan telur, meskipun tidak berpengaruh pada daya tetas telur tersebut.

5. Kesimpulan

Kesimpulannya, pada penelitian ini suplementasi dengan Mn, Zn, Fe, Cu dan Se dapat digunakan untuk ayam petelur tanpa mempengaruhi variabel primer yang berhubungan dengan performa dan kualitas telur. Terdapat pengaruh positif dengan kecenderungan peningkatan produksi telur pada unggas yang diberi mikromineral organik selama periode percobaan. Kesuburan telur lebih tinggi dengan pemberian OMM. Di antara ayam jantan, pemberian OMM menghasilkan peningkatan kekuatan sperma tanpa mengubah nilai untuk variabel terkait semen lainnya yang dievaluasi.

Pembiayaan

Tidak ada hibah khusus dari lembaga pendanaan sektor publik, komersial, atau nirlaba untuk penelitian yang dilaporkan dalam manuskrip ini.

Deklarasi Konflik Kepentingan

Kami, para peneliti dari Universitas Federal Santa Maria, menyatakan bahwa tidak ada konflik kepentingan dalam publikasi ini, karena kami menyadari keseriusan dan perilaku yang tepat dari publikasi Ilmu Reproduksi Hewan.

Referensi

Amin, MHM, Al-Daraji, HJ, 2011. Pengaruh suplementasi diet dengan kadar zinc yang berbeda terhadap penetrasi sel telur sperma dan sifat fertilitas ayam broiler breeder. Pak. J.Nutri. 10, 1083–1088.

Andrews, NC, 2002. Pengangkut logam dan penyakit. Kur. pendapat kimia Biol. 6, 181–186.

Bain, MM, 1990. Kekuatan Cangkang: Evaluasi Mekanis/Ultrastruktural. Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Glasgow 266p. Barber, SJ, Parker, HM, McDaniel, CD, 2005. Kualitas semen breeder broiler yang dipengaruhi oleh trace mineral in vitro. Anak burung. Sains. 84, 100–105.

Brillard, JP, McDaniel, GR, 1985. Keandalan dan efisiensi berbagai metode untuk memperkirakan konsentrasi spermatozoa. Anak burung. Sains. 64, 155–158.

Carvalho, LSS, Rosa, DRV, Litz, FH, Fagundes, NS, Fernandes, EA, 2015. Pengaruh dimasukkannya tembaga organik, mangan, dan seng dalam diet lapisan pada ekskresi mineral, produksi telur, dan kualitas kulit telur. Braz. J.Poult. Sains. 087–092.

Celeghini, ECC, Albuquerque, R., Arruda, RP, Lima, CG, 2001. Evaluasi karakteristik mani ayam jantan yang dipilih untuk pemuliaan dengan pengembangan sisir. Braz. J.Vet. Res. animasi Sains. 38, 177–183.

Edens, FW, 2002. Dalam: Lyons, TP, Jacques, KA (Eds.), Aplikasi Praktis untuk Selenomethionine: Reproduksi Peternak Broiler. Dalam: Bioteknologi Gizi dalam Industri Pakan dan Pangan. Prosiding Simposium Tahunan Alltech ke-18. Nottingham University Press, Nottingham, Inggris, hal. 29–42.

Fromm, D., 1967. Beberapa perubahan fisik dan kimia pada membran vitellin telur ayam selama penyimpanan. J. Ilmu Pangan. 32, 52–56.

Garcia, ERM, Olandi, CCO, Oliveira, CAL, Cruz, FK, 2010. Kualitas telur ayam petelur yang disimpan pada suhu dan kondisi penyimpanan yang berbeda. Putaran. Bra. Produk Kesehatan Satwa 11, 505–518.

Hanafy, MH, El-Sheikh, AMH, Abdalla, EA, 2009. Pengaruh suplementasi selenium organik terhadap kinerja produktif dan fisiologis pada ayam strain lokal. Pengaruh selenium organik (Sel-PlexTM) pada sifat produktif, reproduksi dan fisiologis strain lokal bandarah. Mesir. Anak burung. Sains. J.29, 1061–1084.

Kidd MT, Anthony NB, Johnson Z., Lee SR, 1992. Pengaruh suplementasi seng metionin pada kinerja peternak broiler dewasa. J.Appl. Res Unggas. 1, 207–211.

Kienholz EW, Turk DE, Sunde ML, Hoekstra WG, 1961. Pengaruh defisiensi seng pada pakan ayam. J.Nutri. 75, 211–221.

Kirchgessner, M., Grassmann, E., 1970. Dinamika penyerapan tembaga. Dalam: MILLS, CF (Ed.), Metabolisme Elemen Jejak pada Hewan. Pers Akademik, Edinburgh, hal. 277–287.

Lapointe, S., Ahmad, I., Buhr, MM, 1996. Modulasi motilitas pasca pencairan, kelangsungan hidup, penyerapan kalsium, dan kesuburan sperma sapi oleh magnesium dan mangan. j.

Ilmu Susu. 12, 2163–2169.

Leeson, S., Summers, JD, 2001. Nutrisi Ayam, edisi ke-4. Buku Universitas, Guelph, ON, Kanada.

Lin H., Mertens K., Kemps B., Govaerts T., De Ketelaere B., De Baerdemaeker J., Decuypere E., Buyse J., 2004. Pendekatan baru pengujian pengaruh tekanan panas pada kualitas cangkang telur: mekanik dan sifat material cangkang telur dan membran. Braz. Anak burung. Sains. 45, 476–482.

Mabe, IC, Rapp, M., Bain, M., Nys, Y., 2003. Suplementasi makanan tepung jagung dengan mangan, tembaga, dan seng dari sumber organik atau anorganik meningkatkan kualitas kulit telur pada ayam petelur tua. Anak burung. Sains. 82, 1903–1913.

Mahan, D., Zawadzki, J., Guerrero, R., 2002. Metabolisme mineral dan kesuburan babi: pengamatan dari Amerika Latin hingga Eropa. Dalam: Lyons, TP, Jacques, KA (Eds.), Bioteknologi Gizi di Industri Pakan:

Pendahuluan Simposium Tahunan ke-18 Altech. Nottingham University Press, Nottingham, Inggris. hal. 411–418.

Moreira J., Santos CD, Abreu CMP, Bertechini AG, Oliveira DF, Cardoso MG, 2001. Pengaruh sumber dan kadar selenium pada aktivitas enzimatik glutation peroksidase dan kinerja broiler. Sains Agrotek. 25, 664–666.

Osman, AMR, Wahed, HMA, Ragab, MS, 2010. Pengaruh melengkapi pakan ayam petelur dengan selenium organik terhadap produksi telur, kualitas telur, fertilitas dan daya tetas. Mesir. Anak burung. Sains. J.30, 893–915.

Peebles, ED, McDaniel, CD, 2004. Panduan praktis untuk memahami struktur cangkang telur tetas broiler dan pengukuran kualitasnya. Pertanian Mississippi. Hutan. Exp. Stn. Banteng. 1139.

Renema, RA, 2004. Tanggapan reproduksi terhadap selenium organik selplex® pada peternak ayam pedaging jantan dan betina: berdampak pada sifat produksi dan daya tetas. Dalam: Lyons, TP, Jacques, KA (Eds.), Bioteknologi Gizi di Industri Pakan dan Pangan, Prosiding Simposium Tahunan ke-20 Alltech. Nottingham University Press, Inggris. hal. 81–91.

Richards, MP, 1997. Menelusuri metabolisme mineral pada embrio unggas. Anak burung. Sains. 76, 152–164.

Robinson, DS, King, NR, 1963. Carbonic anhydrase dan pembentukan cangkang telur ayam. Alam 199, 497-498.

Rodriguez-Navarro, A., Kalin, O., Nys, Y., Garcia-Ruiz, JM, 2002. Pengaruh struktur mikro terhadap kekuatan cangkang telur yang diletakkan oleh ayam dari berbagai umur. Sdr. Anak burung. Sains. 43, 395–403.

Rosa, AP, Paganini, FJ, Vieira, NS, Paloschi, JL, 1995. Pengaruh interval inseminasi buatan dan tekanan manajemen inseminasi pada produksi dan fertilitas unggas betina. Sains Pedesaan 25, 443–447.

Rutz F, Pan EA, Xavier GB, Anciuti MA, 2003. Dalam: Lynons TP, Jacques KA (Eds.), Bioteknologi Gizi di Industri Pakan dan Makanan. Prosiding Alltech 19^th Simposium Tahunan. Nottingham University Press, Nottingham, Inggris. hal. 147–161.

Saldanha, ESPB, Garcia, EA, Pizzolante, CC, Faittarone, ABG, Sechinato, A., Molino, AB, Laganá, C., 2009. Pengaruh suplementasi mineral organik pada kualitas telur lapisan semi-berat pada siklus kedua mereka dari awam. Braz. J. Unggas Sci. 11, 215–222.

SAS Institute, 2016. Panduan Pengguna SAS: Statistik. Versi 9.2 Edisi Tinjauan. SAS Institut Inc, Cary, NC.

Shan, TI, Dai, PI, Zhu, P., Chen, L., Wu, W., Li, Y., Li, C., 2017. Pengaruh premix trace mineral organik terhadap kualitas semen, morfologi testis dan ekspresi gen yang berhubungan dengan sintesis testosteron peternak ayam pedaging jantan. Braz. J. Unggas Sci. 19, 481–488.

Stefanello, C., Santos, TC, Murakami, AE, Martins, EN, Carneiro, TC, 2014. Performa produktif, kualitas kerabang telur, dan ultrastruktur kerabang telur dari ayam petelur yang diberi pakan yang dilengkapi dengan trace mineral organik. Anak burung. Sains. 93, 104–113.

Sun Q., Guo Y., Ma S., Yuan J., An S., Li J., 2012. Sumber mineral makanan mengubah profil lipid dan antioksidan pada peternak broiler dan pertumbuhan pasca tetas keturunannya. Biol. Lacak Elem. Res. 145, 318–324.

Surai PF, Kostjuk IA, Wishart G., Macpherson A., Speake B., Noble RC, Ionov IA, Kutz E., 1998. Pengaruh vitamin E dan selenium dari diet ayam jantan pada aktivitas glutathione peroksidase dan kerentanan peroksidasi lipid dalam sperma, tes dan hati. Biol. Lacak Elem. Res. 64, 119–132.

Swiatkiewicz, S., Koreleski, J., 2008. Pengaruh sumber seng dan mangan dalam pakan ayam petelur terhadap kualitas cangkang dan tulang. Dokter hewan. Kedokteran 53, 555–563. Swiątkiewicz, S., Arczewska-Włosek, A., Jozefiak, D., 2014. Khasiat mineral organik dalam nutrisi unggas: tinjauan dan implikasi dari penelitian terbaru. Unggas Dunia. Sains. J.70, 475–486.

Swinkels, JWGM, Kornegay, ET, Verstegen, MWA, 1994. Biologi seng dan nilai biologis kompleks dan kelat seng diet. Memelihara Res. Putaran. 7, 129–149. Vieira, SL, 2008. Mineral chelated untuk unggas. Braz. J. Poultry Sci 10 (2), 73–79.

Yannakopoulos, AL, Tservenigousi, AS, 1986. Karakteristik kualitas telur puyuh. Sdr. Anak burung. Sains. 27, 171–176.

Yenice, E., Mizrak, C., Gültekin, M., Atik, Z., Tunca, M., 2015. Pengaruh suplementasi mangan organik atau anorganik, seng, tembaga dan krom pada kinerja, kualitas telur dan karakteristik penetasan dari ayam petelur. Ankara Üniv Vet Fak Derg 62, 63–68.